45303.nr2b慢病毒載體構(gòu)建和病毒生產(chǎn)

1、2006屆研究生碩士學位論文學校代碼：10269學號：YS03261048攀惑镩舷麓謬NI匕B慢病毒載體構(gòu)建和病毒生產(chǎn)院系：生僉型堂瞳專業(yè)：生堡堂研究方向：袖絲生物堂指導教師：胡廑塑碩士研究生：避2006年5月完成華東師范大學磷士學位論文腦功能基西組學研究所N至毪8慢病毒載體的構(gòu)建和慢病毒生產(chǎn)專業(yè)生理學研究生楊馨指導老師胡應(yīng)和中文摘要[雷戇]N∞A受體由凇l和NR2囂種駐單使構(gòu)成。其中Kl：【2亞單位負責調(diào)控N鹺DA受體離子通道的開閉。

2、在成年動物的前腦區(qū)域(包括皮層、海馬、杏仁體等)只有兩種NR2亞單位能與NRl組含構(gòu)成N～Ⅲ咀受體，即NR2B和NR2A。離體實驗中NRl／NR2B復合體豹EPsP持續(xù)辯聞明熙斃黻l／NR2A復合體長。NR2B駐基在動物幼年階段表達量最高，隨著動物個體的生長發(fā)育，NR2B的表達量逐漸降低。這與N獅A受體介導的EPSP持續(xù)時間的下調(diào)是相一致的。大景實驗數(shù)據(jù)證明，NR2B甄單位與噙乎L動物豹突觸可塑性、學囂記憶、痛覺幫神經(jīng)系統(tǒng)痰病有關(guān)。但到

3、目前為止，對NR2B的研究主要在嚙齒動物如小鼠和大鼠中進犖亍。因此有必要建立NR2B轉(zhuǎn)基因高等動物模型，以進一步研究NR2B亞單位在學習記憶和神經(jīng)系統(tǒng)疾病中所扮演的角色，在本深題孛，我髫l擬克隆入NR2B基送的全長編碼序列cDNA，然屜構(gòu)建NR2B慢病毒載體，并生產(chǎn)NR2B慢病毒顆粒，從面為下一步轉(zhuǎn)基因高等模式動物提供條件。[方法]1采用巢式PCR，自行設(shè)計引物擴增人NR2B基因的全長編碼序列cD№。2采用DNA重組技術(shù)，對已克隆NR2