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1、浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院碩士學(xué)位論文鈍頂節(jié)旋藻螺旋手性的變異規(guī)律與SCAR分子標(biāo)記研究姓名:潘劍用申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生物物理學(xué)指導(dǎo)教師:汪志平20100301三、基于RAPD的節(jié)旋藻螺旋手性相關(guān)SCAR分子標(biāo)記的研究依據(jù)上述在Sp1和Sp1(L)中10條多態(tài)性DNA片段(編號(hào)01~10)的序列,通過(guò)PrimerPremier50軟件搜索與評(píng)價(jià),設(shè)計(jì)了含全部或部分RAPD隨機(jī)引物、長(zhǎng)度為2025mer的SCAR引物(對(duì)應(yīng)編號(hào)Sc0
2、1~Sol0),進(jìn)而在原藻株及其它藻株中進(jìn)行多態(tài)性驗(yàn)證,篩選出與節(jié)旋藻螺旋手性相關(guān)的DNA片段或基因,并作生物信息學(xué)分析。主要結(jié)果如下:(1)在用于驗(yàn)證的5對(duì)左手性螺旋和手中性對(duì)應(yīng)的藻株[Sp一1和Sp1(L)、Sp一3和Sp3(L)、Sp3和Sp3(L)l、Sp10和Sp10(L)、Sp一12和Sp12(L)】,以及3株左手螺旋藻株[Sp一8、Sp9$ISp一1(L專S)】中,只有Se05保持能區(qū)分藻絲為螺旋手性和手中性的多態(tài)性,li
3、I]Sc05在螺旋手性藻絲中無(wú)擴(kuò)增條帶,而在手中性藻絲中有。因此,Sc05為從RAPD標(biāo)記轉(zhuǎn)化成功的SCAR標(biāo)記,其擴(kuò)增產(chǎn)物很可能是與節(jié)旋藻螺旋手性相關(guān)的DNA片段或基因。(2)Sc05擴(kuò)增產(chǎn)物的長(zhǎng)度為527bp,從30位堿基起有1個(gè)含起始密碼子的正向ORF,對(duì)應(yīng)165個(gè)氨基酸,所編碼的蛋白質(zhì)與細(xì)菌中硫酸酯酶同源物AtsG的前165位氨基酸具有較高相似性(63%),且含有1個(gè)硫酸酯酶家族的保守結(jié)構(gòu)域,因而將這一在節(jié)旋藻中的硫酸酯酶同源物
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