21261.對(duì)羥基苯丙酮酸雙加氧酶的生物模擬研究

1、碩士學(xué)位論文對(duì)黼丙酮酸雙加氧酶的生物模擬研究Biomimeticstudyof4一HydroxyphenylpyruVateDioxygenase作者學(xué)科、學(xué)指導(dǎo)完成姓名：專業(yè)：[丁可：教師：登墓妲副麴援日期：20150501大連理工大學(xué)DalianUniversityofTechnology大連理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要仿生天然酶對(duì)底物的特異性識(shí)別和作用越來越成為生物醫(yī)藥領(lǐng)域研發(fā)廉價(jià)、高效、低副作用新型靶向藥物的一大法寶。因此，通過人工

2、設(shè)計(jì)生物酶的結(jié)構(gòu)和功能模型來探究天然酶的活性位點(diǎn)和作用機(jī)制成為近年來生物無機(jī)化學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。為在分子水平上模擬不同活性中心和底物的取代基效應(yīng)對(duì)于對(duì)羥基苯丙酮酸雙加氧酶(4hydroxyphenylpyruvatedioxygenase簡(jiǎn)稱HPPD)的影響，本文主要做了以下工作：(1)設(shè)計(jì)、合成和表征了一個(gè)新的的模型配體2(苯基甲基吡啶2甲基)氨甲基苯甲酸L19H(2(phenylmethyl)pyridin2ylmethyl)ami

3、no)methyl)benzoicacid)，其所含的2N1COOH配位位點(diǎn)是天然HPPD的傳統(tǒng)活性中心。(2)合成了5種對(duì)位取代瓜：OH、Me、H、Br、N02)的苯丙酮酸作為HPPD底物，其中除對(duì)羥基苯丙酮酸得到了烯醇和酮式兩種異構(gòu)體，其他取代基底物都只得到了烯醇式的異構(gòu)體。(3)將實(shí)驗(yàn)室己經(jīng)合成的含2N1COOH(2HislGIul，3N(3His)，3N1COOH(3HislGlu)配位中心的模型配體分別與底物和醋酸亞鐵按1：1

4、：1的比例合成三元亞鐵模型配合物，作為HPPD的結(jié)構(gòu)和功能模型，使用質(zhì)譜，紅外，電子順磁共振等儀器對(duì)其表征，用電化學(xué)，高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)模型配合物與分子氧的室溫反應(yīng)進(jìn)行了定性和定量分析，產(chǎn)物分析結(jié)果如下：①5種對(duì)位取代(R：OH、Me、H、Br、N02)的苯丙酮酸的烯醇式在含2HislGlu、3His、3HislGlu活性中心的模型配合物中與分子氧反應(yīng)產(chǎn)物大部分是對(duì)位取代苯甲醛DKel型產(chǎn)物(DKel：∥二酮雙加氧酶)。②含3H

5、islGlu和2HislGlu的活性中心的模型配合物中對(duì)羥基苯丙酮酸能與分子氧反應(yīng)得到尿黑酸、對(duì)羥基苯乙酸(HPPD型產(chǎn)物)和對(duì)羥基苯甲醛(DKel型產(chǎn)物)；含3His活性中心的模型配合物中對(duì)羥基苯丙酮酸與分子氧反應(yīng)得到對(duì)羥基苯甲醛(DKel型產(chǎn)物)，表明Glu羧基在HPPD反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。③除對(duì)羥基苯丙酮酸底物外，其他取代基限：Me、H、Br、N02)的苯丙酮酸底物與分子氧反應(yīng)未得到HPPD型產(chǎn)物，表明底物對(duì)位的羥基在HPPD的反應(yīng)