溫度對(duì)松材線蟲(chóng)發(fā)育特征的影響.pdf

1、松材線蟲(chóng)病又稱松樹(shù)萎蔫病，是松樹(shù)的一種毀滅性流行病。其病原松材線蟲(chóng)是國(guó)際上公認(rèn)的重要林業(yè)生物檢疫對(duì)象。自1982年傳入南京后在我國(guó)迅速蔓延擴(kuò)散，對(duì)我國(guó)造成了嚴(yán)重的影響，引發(fā)了難以遏制的生態(tài)災(zāi)難。
　　松材線蟲(chóng)作為外來(lái)入侵物種面對(duì)的生態(tài)環(huán)境必然是不同的，而其是如何適合環(huán)境并在新的環(huán)境中生存繁殖的值得我們研究。溫度是生態(tài)環(huán)境的重要組成因子，因此，本研究以溫度為切入點(diǎn)進(jìn)行試驗(yàn)，探討了不同溫度下松材線蟲(chóng)的發(fā)育過(guò)程、歷期及松材線蟲(chóng)卵和體長(zhǎng)、

2、a值響應(yīng)溫度和不同性比配對(duì)的變化，并對(duì)不同培養(yǎng)條件下松材線蟲(chóng)的性比進(jìn)行研究，對(duì)性別決定基因mog-2進(jìn)行了克隆分析，主要結(jié)果如下:
　　15℃和25℃下松材線蟲(chóng)的個(gè)體發(fā)育過(guò)程中，松材線蟲(chóng)的胚胎發(fā)育在形態(tài)和發(fā)育歷期上存在差異。隨著溫度的升高線蟲(chóng)的體長(zhǎng)、a值均增大，運(yùn)動(dòng)性也增強(qiáng)，松材線蟲(chóng)的發(fā)育歷期受溫度的影響，隨著溫度的升高發(fā)育歷期減少。線蟲(chóng)的胚后發(fā)育不同階段的發(fā)育時(shí)間在線蟲(chóng)的整個(gè)胚后發(fā)育歷期中所占比例不同。卵孵化到二齡發(fā)育時(shí)間和二齡

3、到三齡的發(fā)育歷期所占總發(fā)育歷期的比例較大，兩個(gè)階段總的發(fā)育時(shí)間占了總發(fā)育歷期的50％左右。而從成蟲(chóng)到產(chǎn)卵所需時(shí)間所占的比例最小。
　　對(duì)松材線蟲(chóng)響應(yīng)溫度產(chǎn)生的形態(tài)差異進(jìn)行研究。在最適溫度25℃下線蟲(chóng)卵及成蟲(chóng)體長(zhǎng)最小，隨著溫度的升高或降低線蟲(chóng)的卵、體長(zhǎng)和a值均增大，在15℃最大。通過(guò)對(duì)15℃下松材線蟲(chóng)的持續(xù)馴化，得到了穩(wěn)定遺傳的線蟲(chóng)蟲(chóng)株。25℃下培養(yǎng)的松材線蟲(chóng)轉(zhuǎn)入15℃下培養(yǎng)后線蟲(chóng)的體長(zhǎng)顯著增大，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)線蟲(chóng)的體長(zhǎng)減小最后

4、逐漸趨于穩(wěn)定。松材線蟲(chóng)通過(guò)持續(xù)培養(yǎng)改變形態(tài)大小適應(yīng)新的環(huán)境。
　　對(duì)不同環(huán)境培養(yǎng)下松材線蟲(chóng)的性比進(jìn)行研究。松材線蟲(chóng)的性別分化受溫度的影響，不同溫度下松材線蟲(chóng)的性比呈現(xiàn)規(guī)律性的變化，在25℃下線蟲(chóng)性比最大，隨著溫度的升高或降低線蟲(chóng)性比均減小。根據(jù)已得到結(jié)果模擬松材線蟲(chóng)溫度變化的趨勢(shì)線，得出性比在20-25℃之間取得最大值。不同光照條件對(duì)松材線蟲(chóng)的性比也產(chǎn)生影響，黑暗培養(yǎng)比光-暗交替培養(yǎng)下線蟲(chóng)的性比大。人工模擬不同性比配對(duì)下松材線蟲(chóng)交

5、配，發(fā)現(xiàn)在不同性比配對(duì)下松材線蟲(chóng)產(chǎn)卵的大小及卵發(fā)育到成蟲(chóng)的體長(zhǎng)均存在顯著性差異，雌雄比1∶1配對(duì)下產(chǎn)的卵較大，發(fā)育的成蟲(chóng)體長(zhǎng)也較大。而雌雄比3∶1配對(duì)產(chǎn)的卵較小，卵發(fā)育的成蟲(chóng)體長(zhǎng)也較小。此外還探索了松材線蟲(chóng)性別決定關(guān)鍵時(shí)期，初步將性別決定時(shí)期鎖定在胚胎孵化階段。
　　克隆了松材線蟲(chóng)性別決定基因mog-2，經(jīng)分析該基因全長(zhǎng)953bp，包含110bp的內(nèi)含子，843bp完整的ORF序列，包括起始密碼子ATG和終止密碼子TGA，編碼28