13082.嗜酸氧化硫硫桿菌與嗜鐵鉤端螺旋菌的鎳抗性及機(jī)理研究

1、中圖分類號(hào)Q窆三坌：窆2UDC579碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q533嗜酸氧化硫硫桿菌與嗜鐵鉤端螺旋菌的鎳抗性及機(jī)理研究ThenickeltolerancecapabilityandresistancemechanismofAcidithiobacillusthiooxidansandLeptospirillumferriphilium作者姓名：學(xué)科專業(yè)：研究方向：學(xué)院(系、所)：指導(dǎo)教師：副指導(dǎo)教師：論文答辯日期)pJ弓s。許瑩微生物學(xué)重

2、金屬抗性資源加工與生物工程學(xué)院劉學(xué)端教授尹華群梁伊麗副教授答辯委員會(huì)主畦鞋中南大學(xué)二。一三年五月碩士學(xué)位論文摘要嗜酸氧化硫硫桿菌與嗜鐵鉤端螺旋菌的鎳抗性及機(jī)理研究摘要：嗜酸氧化硫硫桿菌(Acidithiobacillusthiooxidans以下簡(jiǎn)稱彳tthiooxidans)和嗜鐵鉤端螺旋菌(Leptospirillumfe，riphilium以下簡(jiǎn)稱Lferriphilium)是微生物冶金中常見的兩種浸礦菌，主要分布在pH低、重金屬

3、離子濃度高的環(huán)境中，因此形成了一系列重金屬的抗性機(jī)制，對(duì)重金屬等毒性離子具有一定的耐受能力。本文研究AtthiooxidansAO1和LferriphiliumYSK這兩株菌在純培養(yǎng)和共培養(yǎng)條件下對(duì)鎳離子耐受性的差異。分析鎳離子脅迫下AtthiooxidansA01和LferriphiliumYSK在純培養(yǎng)和共培養(yǎng)條件下細(xì)菌的生長(zhǎng)情況和與抗鎳相關(guān)的功能基因表達(dá)的差異。結(jié)果表明在純培養(yǎng)條件下AtthiooxidansAO1和Lferrip

4、hiliumYSK對(duì)鎳的最高耐受濃度分別為300mM和100mM；而在共培養(yǎng)體系中彳tthiooxidansA01和LferriphiliumYSK對(duì)鎳的抗性均有所提高。彳六thiooxidansA01在1050mMNi2時(shí)仍可以氧化硫單質(zhì)，LferriphiliumYSK在150mM鎳離子濃度下能夠完全氧化Fe2。利用RealtimePCR技術(shù)分析了0mM和lOOmMNi2濃度下純培養(yǎng)和共培養(yǎng)體系細(xì)菌的生長(zhǎng)變化情況。結(jié)果表明，無外加鎳

5、離子存在時(shí)，相對(duì)于純培養(yǎng)條件，共培養(yǎng)體系中AtthiooxidansA01的加入使LferriphilumYSK的最高菌體濃度明顯升高，大約是純培養(yǎng)時(shí)的2倍。但是純培養(yǎng)條件下，AtthiooxidansA01的最高菌體濃度約是共培養(yǎng)時(shí)最高菌體濃度的兩倍，而且其進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的時(shí)間比共培養(yǎng)時(shí)提前48小時(shí)。在100mMNi2濃度下，LferriphilumYSK的存在促進(jìn)了AtthiooxidansA01的生長(zhǎng)，其最高菌體濃度是純培養(yǎng)時(shí)的5

6、倍。并且共培養(yǎng)條件下AtthiooxidansA01延滯期更短，比純培養(yǎng)條件下進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的時(shí)間提前了48小時(shí)。利用RealtimePCR技術(shù)分析Ni2脅迫下AtthiooxidansA01和L店r，iphiliumYSK與鎳抗性相關(guān)的功能基因的表達(dá)差異。結(jié)果顯示，在共培養(yǎng)體系中由于AtthiooxidansA01的存在，LferriphiliumYSK一些與抗性相關(guān)的基因比純培養(yǎng)時(shí)表達(dá)上調(diào)提前了至少16小時(shí)。另外，Atthiooxi