土壤環(huán)境對大豆胞囊線蟲卵孵化影響及線蟲分子診斷研究.pdf

1、大豆胞囊線蟲病(Heterodera glycinesIchnohe)(SCN)是連作大豆主要病害和產(chǎn)生障礙的主要因素,大豆胞囊線蟲病與連作大豆關(guān)系一直為人們所關(guān)注,該研究在國內(nèi)首次采用長期定位田間試驗方法,對北方典型的代表土類——黑土區(qū)大豆長期連作、豆麥豆迎茬、豆米豆迎茬、麥米豆輪作等主要輪作系統(tǒng)進(jìn)行土壤環(huán)境對大豆胞囊線蟲影響的研究,探討不同土壤環(huán)境種植不同作物和不同大豆品種的根系分泌物和種植后土壤淋溶液與大豆胞囊線蟲卵孵化的關(guān)系,并

2、以在大豆胞囊線蟲老病區(qū)育成的中國抗線品種為材料,對其抗病機(jī)制進(jìn)行探討.描述了大豆長期連作、豆麥豆迎茬、豆米豆迎茬、麥米豆輪作等主要輪作方式下,土壤中大豆胞囊線群體變化情況.提出了大豆連作條件下土壤中胞囊多于其它茬口,豆米豆迎茬和豆麥豆迎茬次之,麥米豆輪作茬最少;但隨著大豆連作年限的增加,連作區(qū)土壤中胞囊有逐步減少的趨勢,認(rèn)為可能是有抑制性土壤存在.用限制性內(nèi)切酶AvaI酶切大豆胞囊線蟲群體的rDNA-ITS的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物后,使中國大豆

3、胞囊線蟲群體和美洲的加拿大、阿根廷和美國大豆胞囊線蟲群體的rDNA-ITS的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物產(chǎn)生不同的RFLP片斷.表明用限制性內(nèi)切酶AvaI可揭示中國和美洲的加拿大、阿根廷和美國大豆胞囊線蟲(H glycines)群體種內(nèi)的遺傳多樣性,首次采用rDNA-ITS-RFLP技術(shù)區(qū)分中國和加拿大、阿根廷大豆胞囊線蟲群體.首次將ISSR分析技術(shù)用于植物寄生線蟲遺傳多樣性研究.篩選的20個ISSR引物中有8個引物可擴(kuò)增出大豆胞囊線蟲較清晰的譜帶,

4、用相應(yīng)的引物可分析大豆胞囊線蟲不同近親系遺傳多樣性;用FISSR2、FISSR5和FISSR6引物擴(kuò)增可得到加拿大、阿根廷、美國和中國的大豆胞囊線蟲不同群體多態(tài)性的譜帶.此結(jié)果說明,應(yīng)用ISSR分子標(biāo)記方法可進(jìn)行大豆胞囊線蟲群體不同地域遺傳多樣性分析.大豆胞囊線蟲種質(zhì)資源保存可選擇乙烯乙二醇作為液氮低溫冷藏的預(yù)處理劑,最佳預(yù)處理組合是,大豆胞囊線蟲2齡幼蟲在10﹪乙烯乙二醇內(nèi)于室溫下21℃室溫下預(yù)處理1h,將大豆胞囊線蟲J2移入40﹪乙