大豆胞囊線蟲抑制性土壤中寄生真菌及其作用研究.pdf

1、大豆胞囊線蟲(Soybean cyst nematode,SCN；Heterodera glycines Ichinohe)是一種土傳的定居性內(nèi)寄生線蟲,而且是危害世界大豆生產(chǎn)的主要病害之一。在同一地塊上連年種植大豆會使土壤中越冬的胞囊大量積累,因此病害隨著大豆連作年限的增加而逐年加重。但是近年來有報(bào)道大豆長期連作后出現(xiàn)大豆胞囊線蟲自然衰退的現(xiàn)象,表現(xiàn)為連續(xù)種植大豆感病品種5年以上,大豆胞囊線蟲的種群密度會明顯降低,原來嚴(yán)重的病害癥狀會

2、大大減輕或消失。在中國科學(xué)院海倫農(nóng)業(yè)生態(tài)試驗(yàn)站長期連作定位區(qū)中也發(fā)現(xiàn)了該現(xiàn)象,并明確了該定位區(qū)的土壤為大豆胞囊線蟲抑制性土壤。為了探討大豆胞囊線蟲抑制性土壤中的抑制因子及其發(fā)生機(jī)制,在該定位區(qū)中大豆胞囊線蟲的胞囊、卵和二齡幼蟲(J2)上分離寄生真菌,并對優(yōu)勢寄生真菌進(jìn)行鑒定,制備發(fā)酵液,研究其對大豆胞囊線蟲卵孵化的抑制和二齡幼蟲活性的致死作用。抑制性土壤的研究對利用其自然衰退機(jī)制防治大豆胞囊線蟲具有重要的學(xué)術(shù)價(jià)值和生產(chǎn)實(shí)踐意義。

3、　　 2009年和2010年在中國科學(xué)院海倫農(nóng)業(yè)生態(tài)試驗(yàn)站大豆連作19年和20年定位區(qū)中采集土樣,通過大豆長期連作和輪作系統(tǒng)的胞囊線蟲數(shù)量進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),大豆長期連作后,胞囊線蟲的飽滿胞囊即可育胞囊、卵及J2數(shù)量均明顯少于大豆輪作系統(tǒng),明確了該土壤為大豆胞囊線蟲自然衰退土壤,即大豆胞囊線蟲抑制性土壤。
　　 采用直接分離法,在大豆胞囊線蟲抑制性土壤以及大豆胞囊線蟲的胞囊、卵和J2上,共分離得到大豆胞囊線蟲寄生真菌284株,其中在

4、抑制性土壤中獲得優(yōu)勢寄生真菌59株,胞囊優(yōu)勢寄生真菌49株,卵優(yōu)勢寄生真菌91株,J2優(yōu)勢寄生真菌4株。對其中的優(yōu)勢寄生真菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定,已鑒定出5個種和1個變種,分別為尖孢鐮孢(Fusarium oxysporum)、尖孢鐮孢芬芳變種(F.oxysporum var.redoles)、禾谷鐮孢(F.graminearum)、銳頂鐮孢(F.acuminatum)、厚垣輪枝菌(Verticillium chlamydosporia)和淡

5、紫擬青霉(Paecilomyces lilacinus)。其中鐮孢菌屬菌株無論在抑制性土壤中還是胞囊上分離頻率均最高,分別為67.12％和25％,為優(yōu)勢屬；淡紫擬青霉在大豆胞囊線蟲各個蟲態(tài)上均分離得到。
　　 實(shí)驗(yàn)室條件下,對優(yōu)勢寄生真菌制備發(fā)酵液,研究其對大豆胞囊線蟲卵孵化和J2活性的作用。鐮孢菌屬F-2和F-9兩菌株發(fā)酵液對大豆胞囊線蟲卵孵化的抑制率分別為95.7％和95.2％；木霉屬T-2發(fā)酵液的抑制作用最強(qiáng),在作用2周后

6、孵化抑制率為97.2％,其次是T-1；而被測定的6株厚垣輪枝菌發(fā)酵液對卵孵化均無明顯的抑制作用。對J2活性的作用測定,發(fā)現(xiàn)鐮孢菌屬F-9和木霉屬T-發(fā)酵液在1h時抑制率分別為90％和84.67％,在所有菌株中見效最快,即對J2的瞬間擊倒率高。鐮孢菌屬F-2以及除了E-13以外的其他5株被測厚垣輪枝菌發(fā)酵液在72h時使全部J2致死。表明鐮孢菌(Fusarium spp.)F-2和F-9,木霉菌(Trichoderma spp.)T-1和T