15724.小鼠胚胎干細(xì)胞干性維持關(guān)鍵蛋白質(zhì)的鑒定與初步研究

1、中圖分類號(hào)墼墨UDC570碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q墨塑密級(jí)公玨小鼠胚胎干細(xì)胞干性維持關(guān)鍵蛋白質(zhì)的鑒定與初步研究Identificationofkeyregulatorsmaintainingstemnessofmurineemb巧onicstemcells作者姓名：學(xué)科專業(yè)：研究方向：學(xué)院(系、所)：指導(dǎo)教師：副指導(dǎo)教師：劉朝山生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)生命科學(xué)院張學(xué)敏研究員李濤副研究員論文答辯日期壟!三：』：12答辯委員會(huì)主席中南大學(xué)二O一三年

2、五月碩士學(xué)位論文摘要小鼠胚胎千細(xì)胞干性維持關(guān)鍵蛋白質(zhì)的鑒定與初步研究摘要：胚胎干細(xì)胞(emb巧onicstemcells，ESC)是一種具有無限增殖能力和無限分化潛能的多能性細(xì)胞，它幾乎能分化成機(jī)體組織中所有類型的細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞的成功分離、培養(yǎng)和定向分化體系的建立為細(xì)胞工程帶來了希望。關(guān)于胚胎干細(xì)胞分化調(diào)控的研究，使我們得以深入認(rèn)識(shí)生命的發(fā)育和進(jìn)化等過程。胚胎干細(xì)胞作為一種極其特殊的多能性細(xì)胞，人們將其維持未分化狀態(tài)和多向分化潛能的能

3、力稱之為“干性”。關(guān)于胚胎干細(xì)胞干性的維持一直是細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)前沿?zé)狳c(diǎn)問題。2012年，來自英國的發(fā)育生物學(xué)家約翰格登和日本京都大學(xué)的山中申彌因在細(xì)胞核重新編程研究領(lǐng)域的杰出貢獻(xiàn)而獲得諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。他們的研究成果揭示了轉(zhuǎn)錄因子0ct4、Sox2、Klf4和cmyc是胚胎干細(xì)胞維持干性的關(guān)鍵調(diào)控蛋白質(zhì)。然而，胚胎干細(xì)胞干性維持是一個(gè)高度復(fù)雜且被精密調(diào)控的生理過程，其詳細(xì)機(jī)制仍不清楚。為深入研究胚胎干細(xì)胞的干性維持機(jī)制，挖掘其

4、關(guān)鍵功能蛋白質(zhì)，我們開展了本研究。由于小鼠胚胎干細(xì)胞具有易于培養(yǎng)、生長較快、體系成熟等優(yōu)點(diǎn)，我們選定小鼠胚胎干細(xì)胞為模型，提出鑒定胚胎干細(xì)胞分化最早期的細(xì)胞蛋白質(zhì)組變化，從中尋找維持小鼠干細(xì)胞干性的關(guān)鍵蛋白質(zhì)。白血病抑制因子(LⅢ)是小鼠胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)抑制分化的主要添加因子，通過在培養(yǎng)體系中撤除LIF、飼養(yǎng)層細(xì)胞(feedercells)、和血清誘導(dǎo)其分化，7小時(shí)后細(xì)胞開始貼壁并發(fā)生形態(tài)變化，我們將這一時(shí)間點(diǎn)作為界定細(xì)胞開始早期分化