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1、 目的:研究SARS-CoV引起人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HLEC)損傷的相關(guān)因子并篩選有效的保護(hù)藥物。研究SARS-CoV相關(guān)受體在不同器官微血管內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá),分析SARS器官病變與其受體表達(dá)之間的關(guān)系。方法:從人肺組織分離、純化和培養(yǎng)微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HLEC)。應(yīng)用四唑鹽比色法(MTT)分析SARS病人血清、SARS-CoV小包膜蛋白蛋白(E蛋白)和刺突蛋白(S蛋白)對HLEC的毒性作用并篩選保護(hù)藥物;應(yīng)用TUNEL法測定S蛋白介導(dǎo)
2、的HLEC凋亡。應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)、蛋白免疫印痕(WesternBlot)、免疫細(xì)胞化學(xué)方法測定SARS-CoV相關(guān)受體血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2(ACE2)、CD209L在不同器官微血管內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)。結(jié)論:SARS-CoVS蛋白是引起SARS肺損傷的重要因素,其中誘導(dǎo)HLEC細(xì)胞調(diào)亡是損傷的重要機(jī)制之一。PGE1和764-3對S蛋白介導(dǎo)的HLEC損傷有明顯的保護(hù)作用。SARS相關(guān)受體的分布研究結(jié)果提示:肺和淋巴系統(tǒng)可
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