大豆異黃酮聯(lián)合葡萄籽提取物原花青素對2型糖尿病大鼠抗氧化功能和胰島細胞凋亡影響的研究.pdf

1、目的：通過建立2型糖尿病大鼠動物模型，觀察糖尿病大鼠胰島細胞凋亡情況，探討大豆異黃酮( SIF)聯(lián)合葡萄籽原青花素(GSPE)對2型糖尿病大鼠胰島β細胞凋亡的干預，為探討天然抗氧化物質(zhì)對糖尿病的預防和治療提供實驗基礎(chǔ)。 方法：SPF級雄性SD大鼠，先隨機分為兩組：正常對照組(A組)；高脂飼養(yǎng)組。正常對照組用普通飼料喂養(yǎng)，高脂飼養(yǎng)組用高脂飼料喂養(yǎng)，4周后，檢測各組大鼠TG(總甘油三酯)，TC(總膽固醇)，F(xiàn)BG(空腹血糖)，F(xiàn)IN

2、S(空腹胰島素)含量，1％小劑量注射鏈尿左菌素(STZ)，誘導2型糖尿病模型。第6周確定造模成功后，將高脂飼養(yǎng)組大鼠隨機分成3組：糖尿病對照組(B組)，SIF+GSPE250mg/kg.d+250mg/kg.d劑量干預組(C組)，SIF+GSPE50mg/kg.d+50mg/kg.d劑量干預組(D組)。A組，B組給消毒自來水灌胃；C組，D組給不同劑量SIF+GSPE灌胃干預。第10周后實驗終止處死大鼠，取大鼠血清和胰腺檢測下列指標：1用

3、羅氏血糖儀取大鼠鼠尾靜脈血檢測各組大鼠大豆異黃酮聯(lián)合葡萄籽原青花素干預前后的血糖值。2制作光鏡病理切片做HE染色，觀察胰腺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)；3檢測各組大鼠血清中超氧化物岐化酶(SOD)，丙二醛(MDA)-氧化氮(，NO)，谷胱甘肽(GSH)含量；4 TUNEL法檢測各組大鼠胰腺組織細胞凋亡情況；5免疫組化法檢測凋亡因子Caspase-3在各組大鼠胰島中表達；6檢測大鼠血清中TNF-α(腫瘤壞死因子α)，IFN-γ(γ干擾素)的含量。

4、 結(jié)果：1通過高脂飼料喂養(yǎng)，大鼠體重，空腹血糖，甘油三酯，總膽固醇以及胰島素含量顯著增加，胰島素敏感指數(shù)下降，與正常對照組相比差異顯著(p<0.05)，小劑量注射STZ后大鼠血糖升高>16.7mmol/L;2糖尿病對照組機體內(nèi)的SOD，GSH含量下降，NO，MDA含量升高，與正常對照組比較差異顯著有統(tǒng)計學意義(p<0.05)，大豆異黃酮聯(lián)合葡萄籽原青花素干預組大鼠血清內(nèi)的SOD，GSH，MDA，NO含量與糖尿病對照組比較差異有統(tǒng)計學意義

5、(p<0.05).3通過對大鼠血清中的TNF-α，IFN-γ含量檢測，TUNEL法胰島細胞凋亡形態(tài)的觀察，免疫組化檢測Caspase-3蛋白表達，發(fā)現(xiàn)糖尿病對照組大鼠胰島細胞的各項凋亡指標與正常組比較均升高(p<0.05)。大豆異黃酮聯(lián)合葡萄籽原青花素干預組大鼠與糖尿病對照組比較有所下降，差異顯著(p<0.05)。 結(jié)論：1通過高脂飼養(yǎng)聯(lián)合小劑量注射STZ成功建立2型糖尿病大鼠模型；2糖尿?qū)φ战M機體內(nèi)的氧化與抗氧化系統(tǒng)平衡破壞出