具有5+12優(yōu)質(zhì)亞基節(jié)節(jié)麥的低分子量谷蛋白基因序列分析.pdf

1、節(jié)節(jié)麥(AegilopstauschiiCoss，DD，2n=2x=14)是普通六倍體小麥(TriticumaestivumL.AABBDD，2n=6x=42)的二倍體祖先物種之一，D染色體組的供體。節(jié)節(jié)麥的遺傳變異類型遠(yuǎn)多于普通小麥D染色體組的遺傳變異類型。節(jié)節(jié)麥中存在很多高分子量谷蛋白和低分子量谷蛋白亞基的遺傳變異類型，是改良小麥品質(zhì)的重要基因資源，如具有5+12和1.5+10優(yōu)質(zhì)亞基組合的節(jié)節(jié)麥。本文根據(jù)已發(fā)表的LMW-GS基因的

2、序列比對(duì)結(jié)果，設(shè)計(jì)了特異引物對(duì)低分子量谷蛋白基因完整編碼區(qū)進(jìn)行擴(kuò)增，并對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物回收、克隆和測(cè)序，其主要結(jié)果如下：1.對(duì)含5+12優(yōu)質(zhì)亞基的節(jié)節(jié)麥材料AS63總DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到長(zhǎng)度分別為0.9kb和1.0kb左右的2條擴(kuò)增條帶，與預(yù)期低分子量麥谷蛋白基因編碼區(qū)的長(zhǎng)度接近。2.經(jīng)克隆、篩選、測(cè)序后獲得3個(gè)不同的低分子量谷蛋白亞基基因序列LMWD-1、LMWD-2和LMWD-3。登錄到NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得GenBank登錄號(hào)AY8

3、41013、AY841014和AY841015。其中，LMWD-1和LMWD-2編碼區(qū)長(zhǎng)度分別為1065bp和972bp，可分別編碼包含322個(gè)和302個(gè)氨基酸殘基的成熟蛋白；而LMWD-3由于編碼區(qū)內(nèi)存在提前終止密碼子，推測(cè)為不表達(dá)的假基因。3.根據(jù)LMWD-1和LMWD-2的氨基酸序列估算的分子量分別為38kDa和34kDa，為C型亞基。根據(jù)N-末端氨基酸序列，又可將LMWD-1、LMWD-2和LMWD-3歸為L(zhǎng)MW-m型LMW-G