野生二粒小麥高分子量谷蛋白亞基等位變異分析.pdf

1、小麥胚乳貯藏蛋白成分對小麥的品質具有重要作用,尤其是占貯藏蛋白主要組分的小麥谷蛋白。小麥谷蛋白由高分子量谷蛋白亞基(HMW-GS)和低分子量谷蛋白亞基(LMW-GS)兩部分組成；HMW-GS與LMW-GS的含量及組成可直接影響小麥面粉的加工和烘烤品質。本研究以由德國慕尼黑工業(yè)大學生命科學中心分子遺傳室提供的175份野生二粒小麥為材料,利用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)方法和質譜技術對上述材料的HMW-GS組成進行

2、鑒定和分析,以期鑒定和篩選一些新的谷蛋白亞基,為進一步克隆優(yōu)質蛋白基因奠定基礎,為今后研究野生二粒小麥HMW-GS與小麥品質的關系提供研究基礎,并為探索利用野生二粒小麥上的特異HMW-GS改良小麥品質的新途徑提供理論依據。主要研究結果如下： HMW-GS的SDS-PAGE分離鑒定利用單向一步SDS-PAGE技術分析了供試材料的高分子量麥谷蛋白亞基等位變異,在Glu-1位點共檢測到36種變異類型,其中Glu-A1位點有4種類型：1

3、、1*、2*和Nu11,出現頻率分別為45.14％、2.86％、4.57％和47.43％；Glu-B1位點有32種類型,比普通小麥1B染色體上HMW-GS的變異類型豐富得多,其中7+8和14.1+15.1亞基分布頻率最高(20.00％),且有7個新亞基：1.1、5*、7*、12*、14.1、15.1和16*。供試小麥材料Glu-1位點的LMW-GS組合共有44種類型,以(null,14.1+15.1)組合為主要類型,占12.58％。該結

4、果為進一步進行小麥亞基研究與品質改良提供了有意義的參考資料。 HMW-GS的MALDI-TOF-MS鑒定本研究對野生二粒小麥高分子量谷蛋白亞基采用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)鑒定技術進行了優(yōu)化,初步摸索出一套樣品用量少、操作簡便快速、適合高通量分析的技術體系。分析結果表明,15-20mg小麥種子樣品足夠進行質譜鑒定。圖譜顯示,不同高分子量蛋白組分分辨度較好,圖譜清晰,分子量多集中在60-100kD