Toll樣受體3介導呼吸道合胞病毒感染的炎癥反應(yīng).pdf

1、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)為副粘病毒科肺炎病毒屬，是有包膜非節(jié)段性的單負鏈 RNA 病毒，是世界范圍內(nèi)嬰幼兒病毒性下呼吸道感染最重要的病毒病原，人們也越來越認識到呼吸道合胞病毒是中老年和免疫缺陷成年人呼吸道感染的重要病毒性病原。病毒通過細胞融合侵入呼吸道上皮，能誘導宿主表達和分泌大量的促炎性因子和免疫調(diào)節(jié)分子。嚴重的RSV感染包括炎癥介質(zhì)的釋放、上皮細胞壞死、炎癥的發(fā)生、大量粘液的產(chǎn)

2、生等，新近發(fā)現(xiàn)的 Toll樣受體，為研究RSV感染的炎癥反應(yīng)機理提供了新的思路。Toll樣受體(Toll-likereceptors，TLRs)為Ⅰ型跨膜蛋白，是識別病原體的重要受體，它們識別細菌、病毒或環(huán)境中的配體，啟動天然免疫反應(yīng)和調(diào)節(jié)獲得性免疫反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn) TLR3(Toll-like receptor 3)能特異性地識別雙鏈RNA(大多數(shù)病毒在復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過程中均可合成)，TLR3介導的信號轉(zhuǎn)導通路參與激活呼吸道上皮細胞，分泌大

3、量炎癥免疫相關(guān)細胞因子，在呼吸道合胞病毒感染引起肺炎的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。呼吸道合胞病毒感染的機制十分復(fù)雜，目前尚不清楚，也無理想的治療藥物和疫苗。因此，深入研究RSV感染的分子機制具有重要醫(yī)學意義。 目的：研究呼吸道合胞病毒感染后TLR3的表達變化；探討TLR3介導RSV感染的炎性反應(yīng)及其部分信號轉(zhuǎn)導通路。 方法：用RSV分別于體外感染A549細胞和體內(nèi)滴鼻感染昆明小鼠，取不同感染時間點的A549細胞和小鼠肺，

4、用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測TLR3和TNF-αmRNA的表達變化，用免疫印跡法檢測TLR3蛋白和核內(nèi)活性NF-κBp65蛋白的表達變化，用酶聯(lián)免疫法檢測細胞培養(yǎng)上清和小鼠血清中的 TNF-α表達變化。 結(jié)果：RSV 感染上調(diào)TLR3 mRNA和TNF-α mRNA的轉(zhuǎn)錄水平；誘導活化核內(nèi)NF-κBp65蛋白的表達；升高細胞培養(yǎng)上清和小鼠血清中TNF-α的分泌量。各指標的變化較對照組均有顯著性差異。 結(jié)論：呼吸道合胞病