inhibinα在卵巢漿液性癌中的表達及化療后的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探索inhibinα蛋白在人卵巢漿液性癌組織中的表達;研究人卵巢漿液性癌細胞株SKOV3的細胞培養(yǎng)技術;探索順鉑(DDP)化療人卵巢漿液性癌細胞株SKOV3后inhibinα的表達變化情況,擬初步探討inhibinα在卵巢癌形成所起的作用。 方法:1、應用免疫組化EliVision方法檢測30例正常卵巢組織、30例卵巢漿液性瘤和45例卵巢漿液性癌中inhibinα蛋白的表達;2、在對臨床標本卵巢癌研究的基礎上進一步用細胞化

2、療方法檢測inhibinα的變化情況;2.1人卵巢漿液性癌SKOV3的細胞培養(yǎng);2.2采用MTT比色法檢測不同的順鉑濃度在不同的時間對SKOV3細胞體外生長抑制作用,進而選取最佳藥物濃度;2.3采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶反應(RT-PCR)技術檢測順鉑化療SKOV3細胞后inhibinαmRNA的表達變化;2.4采用免疫組化方法檢測inhibinα蛋白在順鉑化療SKOV3細胞后的表達變化。 結果:1、臨床標本免疫組化結果顯示inhibi

3、nα蛋白在正常卵巢組織、卵巢漿液性瘤及卵巢漿液性癌均有表達,其陽性表達率分別為93.3%、46.7%、24.4%。inhibinα蛋白在卵巢漿液性癌中的陽性表達率顯著低于卵巢漿液性瘤和正常卵巢組(P<0.05),卵巢漿液性瘤組也顯著低于正常卵巢組(P<0.05);2.1、用不同的順鉑濃度(200、100、50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625umol/L)在不同的時間(12h、24h、36h、48h)分別作用SKOV3

4、細胞后,通過MTT比色法檢測發(fā)現(xiàn)順鉑濃度為12.5umol/L時作用細胞48h后抑制效果最好,當順鉑濃度大于12.5umol/L時,隨著藥物濃度的增加,細胞凋亡也增加,而當順鉑濃度低于12.5umol/L,細胞抑制不明顯,根據(jù)細胞半數(shù)抑制率(IC50)得出最佳藥物濃度為12umol/L;2.2、RT-PCR結果顯示:用順鉑濃度為12umol/L化療SKOV3時,隨著時間的增加,inhibinαmRNA的表達也逐漸增加,且當藥物作用SKO

5、V324h后,inhibinαmRNA的表達明顯高于對照組(P<0.05),其它時間組(4h、8h、12h)與對照組間相比,差別無顯著性(P>0.05);2.3、免疫細胞化學顯示,用順鉑濃度為12umol/L化療SKOV3時,隨著時間的增加,在藥物作用SKOV324h后出現(xiàn)inhibinα蛋白的表達,且inhibinα蛋白的表達明顯高于對照組(P<0.05),但48h組與24h組差別無顯著性(P>0.05):其它時間組(4h、8h、12

6、h)與對照組間相比,差別無顯著性(P>0.05)。 結論:1、從臨床標本顯示,inhibinα蛋白在卵巢漿液性癌的表達比正常卵巢組織和卵巢漿液性瘤明顯下降(P<0.05),表明inhibinα蛋白在卵巢漿液性癌中表達受到抑制;2、從人卵巢癌細胞SKOV3實驗顯示,當化療藥物順鉑作用SKOV3時,隨著作用時間的增加,通過RT-PCR和免疫組化結果顯示inhibinα在化療后其表達都在增加,表明卵巢漿液性腫瘤細胞化療后又促進了inh

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