角膜緣干細(xì)胞的臨床和基礎(chǔ)研究.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文角膜緣干細(xì)胞的臨床和基礎(chǔ)研究姓名：唐瓊燕申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：胡義珍20090501華華華華中中中中科科科科技技技技大大大大學(xué)學(xué)學(xué)學(xué)博博博博士士士士學(xué)學(xué)學(xué)學(xué)位位位位論論論論文文文文4第二部分第二部分第二部分第二部分人胚胎干細(xì)胞標(biāo)記物在角膜緣人胚胎干細(xì)胞標(biāo)記物在角膜緣人胚胎干細(xì)胞標(biāo)記物在角膜緣人胚胎干細(xì)胞標(biāo)記物在角膜緣上皮上皮上皮上皮和和和和角膜角膜角膜角膜上皮上皮上皮上皮的表達(dá)研究的表達(dá)研究的表

2、達(dá)研究的表達(dá)研究【目的目的目的目的】研究5個典型人胚胎干細(xì)胞標(biāo)記物堿性磷酸酶（ALP）、Nanog、Oct4、階段特異性胚胎抗原（SSEA）1和SSEA4在角膜緣上皮和角膜上皮的表達(dá)?！痉椒ǚ椒ǚ椒ǚ椒ā靠梢浦布墑e人角鞏膜組織進(jìn)行冷凍切片，免疫組織化學(xué)方法從蛋白水平檢測ALP、Nanog、Oct4、SSEA1和SSEA4在角膜緣上皮和角膜上皮的表達(dá)，RTPCR法從mRNA水平進(jìn)一步確認(rèn)SSEA4、Nanog和Oct4在角膜和角膜緣的表達(dá)

3、。【結(jié)果結(jié)果結(jié)果結(jié)果】免疫組織化學(xué)法研究顯示SSEA4廣泛表達(dá)于角膜緣上皮和角膜上皮的各層，ALP散在表達(dá)于少量角膜緣前基質(zhì)層細(xì)胞中。SSEA4的表達(dá)經(jīng)RTPCR得到確認(rèn)。免疫組織化學(xué)法和RTPCR均顯示SSEA1和Oct4不表達(dá)與角膜緣上皮和角膜上皮。RTPCR在mRNA水平檢測到Nanog在角膜緣和角膜的表達(dá)，但免疫組織化學(xué)法在蛋白水平未檢測到Nanog在角膜緣和角膜的表達(dá)?！窘Y(jié)論結(jié)論結(jié)論結(jié)論】SSEA4廣泛表達(dá)于成年角膜緣上皮和角

4、膜上皮的各層中，提示SSEA4不能作為一個理想的角膜緣干細(xì)胞標(biāo)記物。Nanog是否表達(dá)于角膜和角膜緣仍需進(jìn)一步確證?！娟P(guān)鍵詞關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞】人胚胎干細(xì)胞標(biāo)記物，ALP，Nanog，Oct4，SSEA1，SSEA4，角膜緣，角膜第三部分第三部分第三部分第三部分應(yīng)用應(yīng)用應(yīng)用應(yīng)用可誘導(dǎo)可誘導(dǎo)可誘導(dǎo)可誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因大鼠模型進(jìn)行角膜轉(zhuǎn)基因大鼠模型進(jìn)行角膜轉(zhuǎn)基因大鼠模型進(jìn)行角膜轉(zhuǎn)基因大鼠模型進(jìn)行角膜緣干細(xì)胞研究的初步探索緣干細(xì)胞研究的初步探索緣干細(xì)