HPLC-MS法識(shí)別肉蓯蓉中生物堿成分研究.pdf

1、“藥食同源”原料肉蓯蓉已越來(lái)越受到大家的青睞，本文以肉蓯蓉為研究對(duì)象，建立了提取純化、液相質(zhì)譜(HPLC-MS)分離識(shí)別肉蓯蓉中生物堿類活性成分的方法，對(duì)肉蓯蓉的深層次開(kāi)發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
　　首先建立同時(shí)測(cè)定膽堿、甜菜堿、阿托品、苦參堿、馬錢子堿和烏頭堿這六種生物堿的儀器分析方法，實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了液相部分和質(zhì)譜部分的各項(xiàng)儀器參數(shù)，以提高生物堿類化合物的檢測(cè)靈敏度。采用ZORBAXSB-C8(150mm×2.1mm，3.5-Micron)色

2、譜柱，流動(dòng)相為4mmol/L乙酸銨溶液(pH=5.0）(A)和乙腈(B);流速為0.2mL/min;柱溫為30℃;進(jìn)樣量10μL;采用梯度洗脫:0.00min，30％乙腈;5.00min，70％乙腈;10.00min，90％乙腈;15.00min，50％乙腈;30.00min，30％乙腈，返回至初始比例，結(jié)果表明，該條件下使所有分析物峰形對(duì)稱且基線分離。
　　其次對(duì)肉蓯蓉中總生物堿的提取工藝進(jìn)行了研究，通過(guò)單因素和正交實(shí)驗(yàn)，確定了

3、最佳提取工藝條件:乙醇濃度20％，提取時(shí)間30.00min，料液比為1∶30，提取溶劑pH4.0，該條件下的總生物堿的提取含量為9.375(g/100g)。
　　優(yōu)化了固相萃取法提取純化六種生物堿類化合物的各項(xiàng)條件，采用混合標(biāo)準(zhǔn)溶液優(yōu)化C18固相萃取柱對(duì)生物堿類化合物的凈化和富集條件，包括上樣pH、洗脫劑種類、洗脫體積和洗脫流速等因素，增強(qiáng)目標(biāo)物的萃取和凈化效率，將建立的方法應(yīng)用于肉蓯蓉中生物堿成分的檢測(cè)，根據(jù)六種生物堿標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)