肉蓯蓉成分的分離鑒定、定量分析及生物活性研究.pdf

1、肉蓯蓉（Cistanche deserticola Y.C.Ma）為列當(dāng)科肉蓯蓉屬多年生根寄生草本植物，是生長在我國西北地區(qū)的名貴補(bǔ)益類中藥材之一，其入藥部分為帶鱗片的干燥肉質(zhì)莖，具有補(bǔ)精血、益腎壯陽、通便潤腸等作用。近年來，由于對肉蓯蓉的過度攫取，導(dǎo)致其植物資源遭到嚴(yán)重破壞，現(xiàn)肉蓯蓉已經(jīng)被列為國家二級保護(hù)植物。本實(shí)驗(yàn)主要以肉蓯蓉肉質(zhì)莖為研究素材，針對其的化學(xué)成分分離鑒定、定量及生物活性進(jìn)行研究。具體結(jié)果如下:
　　第一部分:文獻(xiàn)

2、綜述
　　為了進(jìn)一步研究、開發(fā)和利用肉蓯蓉提供詳盡的信息，對肉蓯蓉屬植物的資源分布、藥理研究以及化學(xué)成分的國內(nèi)外研究進(jìn)行了概述。
　　第二部分:肉蓯蓉不同萃取部位的化學(xué)成分的分離鑒定
　　利用反相硅膠層析、凝膠層析、HPLC制備等分離純化技術(shù)，從肉蓯蓉的甲醇提取物中分離得到了26個化合物。運(yùn)用NMR、UPLC-QQQMS等波譜學(xué)方法及結(jié)合參考文獻(xiàn)數(shù)據(jù)鑒定出它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)，分別是:2-乙酰-3-鼠李糖基-4-咖啡酰葡萄糖

3、(1)、肉蓯蓉苷F(cistanoside F,2)、毛蕊花糖苷(acteoside，3)、異毛蕊花糖苷(isoacteoside，4)、肉蓯蓉苷C(cistanoside C，5)、2'-乙酰毛蕊花糖苷(2'-acetylacteoside，6)、松果菊苷(echinacoside，7)、3-甲基-4-羥基-7-苯乙基-O-鼠李糖-(1-3)-2'-O-乙酰基-O-葡萄糖(8)、肉蓯蓉苷A(cistanoside A,9)、管花苷A(

4、tubuloside A,10)、cistantubulosideC1/C2(11)、肉蓯蓉苷B(cistanoside B，12)、osmanthuside B(13)、leonuride(14)、8-表馬錢子酸(8-epiloganic acid，15)、格魯苷(gluroside，16)、巴爾蒂苷(bartsioside，17)、6-去氧梓醇(6-deoxy-catalpol,18)、kankanoside E(19)、玉葉金花苷

5、酸(mussaenoside acid，20)、kankanoside B(21)、kankanoside O(22)、adenosine(23)、2，6-Dimethyloctan-1，8-diol diglucoside(24)、對羥基香豆(p-coummaricacid25)和β-谷甾醇(β-sitosterol26)。其中化合物1為未見報道的新化合物，化合物24為首次從本屬植物中提出的化合物。
　　第三部分:定量分析不同肉

6、蓯蓉樣品主要成分的含量。
　　利用超高效液相-串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用法(UPLC-QQQMS)同時定量檢測分析并比較不同產(chǎn)地、不同品種及不同前處理方式的肉蓯蓉中14個化合物的含量。研究結(jié)果顯示:(1)14種化合物的檢測限均小于0.0259μg/mL，定量限均小于0.0629μg/mL。14種標(biāo)準(zhǔn)品在一定范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于或等于0.999;方法回收率為100.02％～106.94％;其日內(nèi)及日間精密度實(shí)驗(yàn)的R

7、SD分別為0.97％～2.51％和1.21％～3.27％。該方法靈敏度高、穩(wěn)定性強(qiáng)、操作簡便、快捷、準(zhǔn)確，可用于不同產(chǎn)地、不同種類及不同前處理方式的肉蓯蓉及其相關(guān)食品藥品的質(zhì)量控制。(2)同一種肉蓯蓉經(jīng)過不同的干燥方法處理，會導(dǎo)致其成分含量產(chǎn)生明顯的差別，冷凍干燥處理的肉蓯蓉中的毛蕊花糖苷(acteoside，3)、松果菊苷(echinacoside，7)的含量明顯高于人為烘干及自然風(fēng)干處理的肉蓯蓉樣品。同時也建立一種靈敏度高、穩(wěn)定性強(qiáng)

8、、操作簡便、快捷、準(zhǔn)確地肉蓯蓉及其相關(guān)食品藥品的質(zhì)量控制方法。
　　第四部分:抗氧化活性的研究
　　從肉蓯蓉提取物中篩選出10個苯乙醇苷類化合物具有良好的抗清除DPPH游離基活性。其中，肉蓯蓉的代表性化合物毛蕊花糖苷(acteoside，3)、松果菊苷(echinacoside，7)也具有良好的抗氧化性，其IC50值分別為14.7和23.4μg/mL。而化合物異毛蕊花糖苷(isoacteoside，4)的抗氧化性最強(qiáng)，其IC