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文檔簡介
1、黃曲霉毒素(Aflatoxins)是一類主要由黃曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(A.parasiticus)產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物,具有強毒性和強致癌性,嚴重危害人畜健康。它能污染玉米等多種糧食和經(jīng)濟作物,從而引發(fā)世界范圍食品和飼料的安全問題。研究表明,多種植物精油可有效抑制黃曲霉的生長及產(chǎn)毒。因此選取肉桂醛(cinnamldehyde)、檸檬醛(citral)和丁香酚(eugenol)比較三者對黃曲霉抑制作用,并解
2、析其抑制黃曲霉菌產(chǎn)毒的分子機制。選取抑制效果最好的肉桂醛應用到玉米中,分析不同儲存條件下肉桂醛熏蒸玉米的實際應用效果,為控制黃曲霉毒素的污染提供理論依據(jù)。
主要的研究方法和結果:
1.通過液體培養(yǎng)-直接接觸法比較了三種植物精油:肉桂醛、檸檬醛和丁香酚在不同濃度下對黃曲霉生長及產(chǎn)毒的影響。發(fā)現(xiàn)三者均能顯著抑制黃曲霉,其中肉桂醛抑制效果最好,最低抑菌濃度(minimal inhibitory concentration,
3、MIC)為100μg/mL,可完全抑制黃曲霉的生長及產(chǎn)毒。丁香酚和檸檬醛的最低抑菌濃度(MIC)和最低完全抑制產(chǎn)毒濃度則都為500μg/mL。
2.利用Real-time PCR檢測黃曲霉5個關鍵的毒素合成基因:aflR、nor-1、ver-1、omtA和aflT的在不同時間點上動態(tài)表達水平,解析三種植物精油對毒素合成基因表達的影響,揭示抑制毒素合成的機理。結果顯示在1-7 d的培養(yǎng)中,50μg/mL肉桂醛和125μg/mL丁
4、香酚分別對ver-1基因和omtA基因表達的下調(diào)最顯著。推測肉桂醛和丁香酚抑制產(chǎn)毒可能與ver-1和omt基因表達量顯著下調(diào)導致其相應轉錄產(chǎn)物減少相關。100μg/mL檸檬醛對aflT基因表達下調(diào)作用最強,但6-7 d時不能抑制黃曲霉產(chǎn)毒。
3.研究了添加量對肉桂醛抑制黃曲霉生長及產(chǎn)毒的影響。玉米水分含量14%時,肉桂醛添加濃度150-600μg/mL范圍內(nèi),對黃曲霉生長與產(chǎn)毒抑制作用呈現(xiàn)劑量依賴性。肉桂醛600μg/mL(實
5、際揮發(fā)濃度96μg/mL)完全抑制黃曲霉生長,對AFB1產(chǎn)生的抑制率高達98.98%。
4.研究了玉米水分含量對肉桂醛抑制黃曲霉生長及產(chǎn)毒的影響。玉米水分含量14-40%范圍內(nèi),肉桂醛對黃曲霉污染的抑制率隨玉米水分含量的升高顯著下降,14%時抑制率最高,為88.24%;肉桂醛對AFB1始終保持較強的抑制作用,14%時產(chǎn)毒抑制率最高,為97.51%。
5.研究了儲藏溫度對肉桂醛抑制黃曲霉生長及產(chǎn)毒的影響。20-37℃范
6、圍內(nèi),肉桂醛對黃曲霉污染的抑制率隨溫度的升高呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,28℃抑制率最高,為85.67%;肉桂醛對AFB1的產(chǎn)生則始終保持較強的抑制作用,其中20℃時抑制率最高,為91.00%。低溫有利于肉桂醛對黃曲霉生長及產(chǎn)毒的抑制作用。
三種植物精油:肉桂醛、檸檬醛和丁香酚均能顯著抑制黃曲霉的生長及產(chǎn)毒,其中肉桂醛抑制效果最佳。與傳統(tǒng)熏蒸類防霉劑相比,肉桂醛來源天然、安全性高,將其作為天然霉菌和毒素形成抑制劑應用到糧食中,具有
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