紫花苜蓿GSTP1-L105V和CYP2A6基因轉(zhuǎn)化植株再生體系誘導(dǎo)研究.pdf

1、隨著粗放式制造業(yè)的極度擴(kuò)張，我國(guó)的土壤重金屬和有機(jī)物污染問(wèn)題日益凸顯。由于土壤問(wèn)題與人們的日常食品安全和身體健康息息相關(guān)，妥善治理該項(xiàng)污染問(wèn)題便顯得尤為重要。
　　谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶基因GSTP1-1105V和細(xì)胞色素抗氧化酶基因CYP2A6分別是已證實(shí)的與重金屬和有機(jī)物相關(guān)的基因。雖然，野生紫花苜蓿具有一定的累積重金屬和分解有機(jī)物的作用，但該作用不足以用于治理土壤污染，本文旨在利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將上述兩種基因?qū)胱匣ㄜ俎Ｖ幸蕴岣咂淇?/p>

2、重金屬和有機(jī)物能力。
　　研究中，我們先構(gòu)建含單個(gè)目的基因的表達(dá)載體pBI121-GSTP1-1105V。將其導(dǎo)入農(nóng)桿菌后，再用凍融法將另一目的基因CYP2A6轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌中。之后，以“金皇后”紫花苜蓿下胚軸作為受體，經(jīng)過(guò)預(yù)培養(yǎng)、浸染、共培養(yǎng)、一次脫菌、二次脫菌、繼代培養(yǎng)、分化培養(yǎng)、生根培養(yǎng)最終得到具有重金屬和有機(jī)物抗性的轉(zhuǎn)基因植株共100株。
　　經(jīng)PCR和RT-PCR檢測(cè)和轉(zhuǎn)基因植株對(duì)CdSO4和TCE的耐受性試驗(yàn)，我們確