MSCs與EPCs細(xì)胞聯(lián)合移植對大鼠腦缺血損傷的影響.pdf

1、目的：
　　通過大腦中動脈閉塞模型(MCAO)的大鼠尾靜脈途徑聯(lián)合移植大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)和血管內(nèi)皮祖細(xì)胞（EPCs）與單移植MSCs的對比研究，觀察不同移植方式對大鼠腦缺血損傷后神經(jīng)行為學(xué)、腦梗死體積、病理形態(tài)學(xué)的比較，探討何種移植方式最有利于神經(jīng)功能恢復(fù)，以及細(xì)胞聯(lián)合移植作用和可能作用機(jī)理。
　　方法：
　　取體重150gSPrague一Dawley（SD）大鼠長骨的骨髓細(xì)胞，經(jīng)過不同的培養(yǎng)方式，分別獲

2、得MSCs和EPCs；利用線拴法制作SD大鼠大腦中動脈缺血模型(MCAO)(n=100)，隨機(jī)均分為，缺血自然恢復(fù)組（A組），PBS對照組（B組），單移植MSCs組（C組）和聯(lián)合移植MSCs+EPCs組（D組）。SD大鼠腦缺血2h再灌注24小時(shí)后，D組將2×106個MSCs和2×106個EPCs通過尾靜脈移植入MCAO大鼠體內(nèi)；C組將通過尾靜脈移植總體積相等的含2×106個MSCs通過尾靜脈移植入MCAO大鼠體內(nèi)；B組經(jīng)尾靜脈注入總體積

3、相等的PBS液入MCAO大鼠體內(nèi)；A組麻醉后，做好缺血模型后不作任何治療性處理縫合皮膚。第7天后，分別觀察神經(jīng)行為學(xué)評分，腦梗死體積，HE染色，腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、腦梗死體積： A組的梗死體積為(210.3±11.7) mm3,B組為(211.6±9.8)mm3，C組為(163.8±12.4)mm3，D組(132.7±8.1)mm3，D組與C組、B組、A組相比有顯著差異(P<0.05)

4、，C組與B組、A組相比有差異(P<0.05)；而B組、A組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；
　　2、神經(jīng)行為學(xué)評分:移植前各組評分：A組(3.78±0.49)分、B組(3.78±0.50)分、C組(3.78±0.49)分、D組(3.78±0.53)分之間相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；移植后第7天，D組大鼠神經(jīng)功能明顯恢復(fù)(2.29±0.29)分，與C組(3.27±0.31)分、B組(3.74±0.31)分，A組(3.74±0

5、.31)分相比有顯著差異(P<0.05)，C組與B組、A組相比有顯著差異(P<0.05)；而B組、A組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；
　　3、病理形態(tài)學(xué)
　?。?）：A組、B組鼠腦組織中BDNF表達(dá)較少，C組與D組BDNF表達(dá)較多，陽性細(xì)胞胞漿呈棕褐色，而細(xì)胞核不著色，多為海馬和皮層的錐體細(xì)胞或顆粒細(xì)胞，而D組BDNF表達(dá)比C組增多。SPSS系統(tǒng)進(jìn)行分析后得出結(jié)論:7天D組大鼠腦BDNF表達(dá)水平(22.0010±0.09

6、48)明顯高于C組(19.1810±0.1128)、B組(15.5441±0.0539)、A組(15.5607±0.0481)，差異具有顯著性(P<0.05)，并且C組與B組、A組差異有顯著性(P<0.05)，而B組、A組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　?。?）：腦組織切片HE染色顯示：低倍鏡下，D組皮層神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量多，胞漿豐富,細(xì)胞受損較B組、A組明顯減輕。鏡下可見散在的小軟化灶，其余組織結(jié)構(gòu)相對較好。B組、A組組織明顯水