胎球蛋白B在人類受精過程中的作用初探.pdf

1、研究目的：
　　初步探討胎球蛋白在人卵丘細(xì)胞中的定位表達(dá)及對受精結(jié)局的影響。為卵子質(zhì)量評(píng)估及優(yōu)質(zhì)胚胎選擇提供客觀定量的依據(jù)
　　研究對象和方法：
　　1.收集安徽醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院生殖中心2013年1月～2014年12月在本中心行IVF-ET治療的64名不孕癥患者，分為兩組，實(shí)驗(yàn)組為受精低下者30個(gè)周期。對照組為選擇同日獲卵，但受精正?；颊吖?4個(gè)周期。不孕原因均為女方輸卵管阻塞并排除染色體異常、卵巢低反應(yīng)等疾病。比

2、較兩組間的患者一般情況及妊娠結(jié)局。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS17.0軟件處理，組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn)，率的比較用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
　　2.分別收集受精低下患者卵母細(xì)胞和正常受精患者卵母細(xì)胞的卵丘細(xì)胞及卵泡液，利用免疫組化對卵丘細(xì)胞中的胎球蛋白進(jìn)行定位檢測。利用實(shí)時(shí)定量熒光PCR和Western-Blot對顆粒細(xì)胞中胎球蛋白mRNA和胎球蛋白的表達(dá)量進(jìn)行測定。采用ELISA試劑盒檢測兩組患者卵泡液中胎球蛋白的含量。

3、
　　結(jié)果:
　　1.兩組患者的IVF臨床數(shù)據(jù)：兩組患者年齡，體重指數(shù),不孕年限，基礎(chǔ)激素，卵巢刺激用藥天數(shù)，Gn用藥總量，注射HCG日內(nèi)膜厚度及E2值和移植周期數(shù)間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P>0.05)，而研究組的2PN受精率、卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率、臨床妊娠率均明顯低于對照組，差異顯著（P<0.05）。
　　2.利用熒光定量PCR擴(kuò)增檢測胎球蛋白mRNA在卵丘細(xì)胞中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在受精低下患者卵母細(xì)胞的顆粒細(xì)胞中表達(dá)水平顯

4、著低于正常組（P<0.05）。選取受精低下患者顆粒細(xì)胞及正常受精患者顆粒細(xì)胞，利用western blot法和免疫組化檢測細(xì)胞中胎球蛋白含量。結(jié)果顯示，受精低下患者中卵母細(xì)胞的顆粒細(xì)胞中胎球蛋白表達(dá)水平明顯降低。利用ELISA試劑盒檢測受精低下患者及正常受精患者卵泡液中胎球蛋白含量，發(fā)現(xiàn)受精低下組患者卵泡液中胎球蛋白含量顯著低于受精正常組。
　　結(jié)論：胎球蛋白B及胎球蛋白mRNA在卵丘細(xì)胞胞漿和胞核中表達(dá)，可在一定程度上預(yù)測受精結(jié)