經(jīng)皮電刺激對(duì)大鼠海綿體神經(jīng)損傷后nNOS表達(dá)的研究.pdf

1、[研究背景]陰莖勃起功能障礙(erectiledysfunction，ED)是最常見的男性性功能障礙，法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域在人身傷害、交通事故、離婚、強(qiáng)奸、醫(yī)療糾紛等方面都會(huì)涉及陰莖勃起功能的鑒定。雖然通過夜間勃起功能監(jiān)測(NPT)、彩色雙功能多普勒(CDDU)、陰部誘發(fā)電位等方法可以對(duì)陰莖勃起功能進(jìn)行鑒定，但為了深入研究ED的發(fā)生機(jī)制，并探討ED分子水平可能的診斷標(biāo)準(zhǔn)，必須建立動(dòng)物模型。作為支配陰莖勃起的最重要神經(jīng)，海綿體神經(jīng)是建立神經(jīng)性ED模

2、型的首選神經(jīng)，而大鼠在盆腔、陰莖的血管及神經(jīng)解剖等方面都與人有較強(qiáng)的相似性，而且其價(jià)格也是ED研究的動(dòng)物中最適宜的，因此大鼠海綿體神經(jīng)損傷是ED研究的理想實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?神經(jīng)性ED的診斷技術(shù)雖然取得了很大進(jìn)步，但神經(jīng)性ED的治療仍然是十分困難的，目前尚無有效的治療方法。電刺激是一種傳統(tǒng)的神經(jīng)康復(fù)療法，可能通過促進(jìn)生長因子的趨化作用、增加雪旺細(xì)胞的活性等促進(jìn)神經(jīng)再生。一氧化氮(NO)是陰莖勃起的關(guān)鍵性神經(jīng)遞質(zhì)，通過舒張陰莖海綿體平滑肌

3、細(xì)胞而引起陰莖勃起，一氧化氮合酶(NOS)是合成NO的關(guān)鍵酶。通過神經(jīng)性一氧化氮合酶(nNOS)檢測可以反映電刺激后海綿體神經(jīng)功能恢復(fù)的情況，間接反映陰莖的勃起功能。 [目的]本實(shí)驗(yàn)擬建立SD大鼠雙側(cè)海綿體神經(jīng)鉗夾傷模型，觀察傷后勃起功能及nNOS的改變，并定時(shí)定量給予經(jīng)皮電刺激后觀測nNOS恢復(fù)的情況。為海綿體神經(jīng)損傷所致ED的法醫(yī)學(xué)鑒定提供分子水平依據(jù)，也為臨床上神經(jīng)性ED的治療提供一種可能的方法。 [材料與方法]將

4、30只SD成年雄性大鼠分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，建立海綿體神經(jīng)損傷致神經(jīng)性ED模型。然后另取30只大鼠分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，按海綿體神經(jīng)損傷后是否給予經(jīng)皮電刺激，將實(shí)驗(yàn)組分為2組(損傷后定時(shí)、定量給予經(jīng)皮電刺激組10只；損傷后未給予任何干預(yù)措施組10只)；對(duì)照組為正常SD大鼠，10只，未作任何處理。通過電刺激海綿體神經(jīng)觀察其勃起現(xiàn)象，一個(gè)月后取陰莖中段組織，切片，光鏡觀察大鼠陰莖海綿體的解剖結(jié)構(gòu)，免疫組化方法檢測nNOS表達(dá)的情況。分析海綿體神

5、經(jīng)損傷后nNOS表達(dá)變化及經(jīng)皮電刺激后nNOS恢復(fù)情況。 [結(jié)果]通過電刺激反應(yīng)證實(shí)造模成功，損傷組與對(duì)照組有顯著性差異。在切片上觀察任意4個(gè)高倍視野(400×)，計(jì)數(shù)視野中nNOS陽性神經(jīng)纖維灰度和吸光度，損傷后未給經(jīng)皮電刺激組198.12±3.27和6.12±1.17，損傷后給予經(jīng)皮電刺激組191.27±4.20和7.68±1.72，正常對(duì)照組分別為180.39±3.77和8.25±1.03。 損傷后未給經(jīng)皮電刺激組

6、與對(duì)照組nNOS陽性神經(jīng)纖維灰度和吸光度存在顯著性差異(P＜0.05)，損傷后未給經(jīng)皮電刺激組與經(jīng)皮電刺激組間nNOS陽性神經(jīng)纖維灰度和吸光度存在顯著性差異(P＜0.05)。 [結(jié)論]海綿體神經(jīng)位于前列腺的后外側(cè)，通過雙側(cè)鉗夾海綿體神經(jīng)，可以導(dǎo)致勃起功能的喪失，即神經(jīng)性ED。海綿體神經(jīng)損傷是建立神經(jīng)性ED模型的良好方法，通過對(duì)盆神經(jīng)的電刺激實(shí)驗(yàn)可以證實(shí)模型是否成功。損傷后定期給予定時(shí)定量的經(jīng)皮電刺激可以促進(jìn)海綿體神經(jīng)功能的恢復(fù)，