病理性瘢痕的射頻消融治療及基于基因表達(dá)譜的藥物篩選實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　評(píng)估射頻消融治療病理性瘢痕的臨床療效,為進(jìn)一步解決消融術(shù)后瘢痕復(fù)發(fā)的問(wèn)題，進(jìn)行了藥物篩選的實(shí)驗(yàn)研究。采用表達(dá)譜芯片對(duì)病理性瘢痕組織和正常人皮膚組織進(jìn)行檢測(cè)，篩選病理性瘢痕組織的差異表達(dá)基因。運(yùn)用生物信息學(xué)手段，依據(jù)差異基因表達(dá)譜數(shù)據(jù)，篩選治療病理性瘢痕的藥物。在兔耳瘢痕模型上，對(duì)篩選出的藥物進(jìn)行驗(yàn)證。
　　方法：
　　1）使用皮膚射頻治療儀在病理性瘢痕組織上進(jìn)行射頻消融，術(shù)后采用溫哥華瘢痕量表，對(duì)療效進(jìn)行評(píng)

2、估。2）應(yīng)用基因表達(dá)譜芯片篩選病理性瘢痕組織與正常人皮膚組織的差異表達(dá)基因。對(duì)差異表達(dá)基因數(shù)據(jù)進(jìn)行Go和Pathway分析，闡釋瘢痕發(fā)生機(jī)制。3）將差異表達(dá)基因數(shù)據(jù)，輸入在線的Cmap數(shù)據(jù)庫(kù)中，運(yùn)用生物信息學(xué)手段，篩選可以用于治療病理性瘢痕的化合物或藥物。4）將篩選出的藥物紫衫醇，按不同濃度配制藥液，以注射的方式作用于兔兒瘢痕動(dòng)物模型上，觀察藥物對(duì)兔耳增生瘢痕的組織形態(tài)學(xué)作用，尋找最佳的用藥濃度范圍。
　　結(jié)果：
　　1）患

3、者采用射頻消融治療病理性瘢痕后，瘢痕的顏色、厚度、柔軟度都得到了顯著改善。2）病理性瘢痕組織與正常人皮皮膚組織相比，差異表達(dá)2倍以上基因5001個(gè)；差異表達(dá)5倍以上基因956；差異表達(dá)20倍以上基因144個(gè)。3）表達(dá)上調(diào)基因的相關(guān)通路有：細(xì)胞外基質(zhì)受體反應(yīng)，黏著斑，O-GalNAc聚糖的生物合成，TGF-β信號(hào)通路，細(xì)胞因子及其受體的相互作用，糖胺聚糖，Toll樣受體信號(hào)通路，細(xì)胞粘附分子，腫瘤相關(guān)信號(hào)通路，肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架體系等。表達(dá)

4、下調(diào)基因的相關(guān)通路有：細(xì)胞色素P450酶，花生四烯酸代謝，性激素代謝，維生素A代謝，類固醇合成，脂類代謝，氨基酸降解等。4）在分子功能方面，上調(diào)的差異性表達(dá)基因，主要與蛋白的結(jié)合，金屬離子的結(jié)合，細(xì)胞外基質(zhì)的構(gòu)成，肽酶的活性，整合蛋白結(jié)合，轉(zhuǎn)錄因子活性等相關(guān)。下調(diào)的差異性表達(dá)基因，主要與酶的活性、離子的結(jié)合與運(yùn)動(dòng)、離子通路的活性相關(guān)。5）從生物學(xué)過(guò)程來(lái)看，上調(diào)的差異性表達(dá)基因，主要與細(xì)胞粘附，膠原纖維構(gòu)成，膠原蛋白分解，細(xì)胞分化，細(xì)胞信

5、號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，細(xì)胞缺氧反應(yīng)，細(xì)胞基質(zhì)粘附，整聯(lián)蛋白介導(dǎo)的信號(hào)通路，神經(jīng)骨骼發(fā)育等相關(guān)。下調(diào)的差異性表達(dá)基因，主要與細(xì)胞氧化還原反應(yīng)，細(xì)胞分化，脂類的代謝與合成以及炎性反應(yīng)相關(guān)。6）從Cmap數(shù)據(jù)庫(kù)中，篩選出16個(gè)負(fù)性富集分?jǐn)?shù)較高的藥物。7）藥物紫衫醇對(duì)兔兒增生性瘢痕的成纖維細(xì)胞增殖、膠原沉積、微血管增生均有抑制作用。在一定濃度范圍內(nèi)，兔耳瘢痕增生程度隨藥物濃度的增加而減少，與藥物濃度呈負(fù)相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1）射頻消融治療病理