正常人及甲狀腺相關(guān)眼病眼眶前脂肪細(xì)胞原代培養(yǎng)及鑒定.pdf

1、目的：建立正常人和甲狀腺相關(guān)眼病(TAO)患者眼眶前脂肪細(xì)胞原代培養(yǎng)模型，以證實(shí)’TAO患者眼眶中存在前脂肪細(xì)胞，為深入研究TAO的發(fā)病機(jī)制打下基礎(chǔ)。 方法：采用脂肪組織的組織塊培養(yǎng)的方法培養(yǎng)正常人和TAO患者眼眶前脂肪細(xì)胞。正常人眶脂肪組織取自眼球摘除術(shù)的患者眼眶，TAO患者眶脂肪組織取自行開眶減壓術(shù)的患者眼眶。通過對(duì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)的觀察，和MTT方法測(cè)定生長曲線，研究前脂肪細(xì)胞的生長特性。利用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞表面抗原的表達(dá)鑒定

2、培養(yǎng)的細(xì)胞。 結(jié)果：成功培養(yǎng)了正常人和TAO患者眼眶前脂肪細(xì)胞，分離培養(yǎng)的正常人及TAO患者眼眶前脂肪細(xì)胞形態(tài)均一，增殖，分化旺盛。細(xì)胞為長梭形，形態(tài)與成纖維細(xì)胞類似。正常人和TAO患者眼眶前脂肪細(xì)胞相比，后者增殖更為旺盛，細(xì)胞形態(tài)基本一致。兩種前脂肪細(xì)胞原代均生長較慢，2，3代后生長加快。原代培養(yǎng)3-5天后可見組織塊周圍有細(xì)胞游出，20天左右可以進(jìn)行第一次傳代。兩種來源的前脂肪細(xì)胞生長曲線基本一致，均為第5天進(jìn)入對(duì)數(shù)生長期，9