淺藍(lán)菌素阻遏骨肉瘤細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討脂肪酸合成酶（FAS）抑制劑-淺藍(lán)菌素（Cerulenin）能否阻遏人骨肉瘤細(xì)胞增殖與誘發(fā)凋亡。 方法：采用人骨肉瘤細(xì)胞系U2-OS，在體外實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察及四甲基偶氮唑藍(lán)法（MTT法）觀察FAS抑制劑淺藍(lán)菌素對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞U2-OS生長(zhǎng)的抑制作用，并通過(guò)流式細(xì)胞儀（FCM）對(duì)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期變化進(jìn)行檢測(cè)。 結(jié)果：U2-OS細(xì)胞在淺藍(lán)菌素作用下，細(xì)胞增殖被阻遏，并呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系，2.5、5、10和2

2、0mg/L淺藍(lán)菌素作用24h的抑制率分別為（18.58±2.49）％、（35.11±3.49）％、（56.60±3.53）％和（79.69±2.83）％，與對(duì)照組比較有顯著差異（P<0.05）。光鏡下凋亡細(xì)胞典型形態(tài)改變?yōu)榧?xì)胞皺縮，胞膜結(jié)構(gòu)保持完整，胞核固縮，核碎裂，染色質(zhì)濃縮邊集，胞漿空泡化明顯，細(xì)胞表面有較多濃縮的胞質(zhì)突起。流式細(xì)胞儀顯示淺藍(lán)菌素可誘發(fā)骨肉瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡并且此作用呈劑量、時(shí)間依賴趨勢(shì)，U2-OS細(xì)胞經(jīng)2.5、5、10

3、、20mg/L淺藍(lán)菌素作用24h的凋亡率分別為7.62±1.03％、22.95±3.12％、38.29±2.35％和51.49±1.76％，與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；U2-OS細(xì)胞經(jīng)5mg/L淺藍(lán)菌素作用24、48、72h的凋亡率分別為（27.92±2.69）％、（45.27±3.25）％和（60.39±1.86）％，與其對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。流式細(xì)胞周期分析顯示淺藍(lán)菌素能阻滯腫瘤細(xì)胞從S期

4、進(jìn)入G2/M期，并誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡，淺藍(lán)菌素處理后24h的細(xì)胞S期比例明顯增高、G2/M期細(xì)胞比例明顯減少，藥物濃度為10mg/L時(shí)，S期細(xì)胞比例由對(duì)照組的（38.26±0.78）％升高至處理組的（47.95±0.64）％，G2/M期細(xì)胞比例由對(duì)照組的（16.58±0.63）％減少至處理組的（1.59±0.27）％，與其對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論：淺藍(lán)菌素能阻遏骨肉瘤細(xì)胞增殖，其作用具有時(shí)間和劑量依賴性，