病毒載體介導(dǎo)端粒酶催化亞基反義基因治療卵巢癌的研究.pdf

1、目的:研究探討病毒載體介導(dǎo)端粒酶催化亞基反義基因治療卵巢癌的可行性.方法:該文第一部分應(yīng)用基因克隆技術(shù),首先構(gòu)建并鑒定了含反向hTERTcDNA重組質(zhì)粒;第二部分將重組載體導(dǎo)入人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞系ES-2,觀察轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞生長(zhǎng)及增殖狀況和端粒酶活性;第三部分以逆轉(zhuǎn)錄病毒為載體,以PT67細(xì)胞系包裝攜帶目的基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒,將目的基因?qū)胨拗?觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)情況及該治療的毒性作用.結(jié)論:1.反向hTERTcDNA序列可以明顯

2、抑制體外培養(yǎng)的卵巢癌細(xì)胞系ES-2的生長(zhǎng)、增殖和代謝能力,下調(diào)細(xì)胞hTERTmRNA的表達(dá),抑制端粒酶的活性,部分逆轉(zhuǎn)其惡性表型.2.構(gòu)建了國(guó)內(nèi)第一個(gè)裸鼠卵巢癌腹水瘤模型,成瘤率100％,裸鼠出現(xiàn)腹部膨大的時(shí)間與接種SK-OV-3的細(xì)胞數(shù)呈現(xiàn)相關(guān)性,即接種SK-OV-3的細(xì)胞數(shù)越多,裸鼠出現(xiàn)腹部膨大所需的時(shí)間越短,3.復(fù)制缺陷型逆轉(zhuǎn)錄病毒pLXSN-AS-hTERTRv治療能明顯抑制裸鼠皮下瘤及腹水的生長(zhǎng),雖然有一定的毒性作用,但是通過(guò)