下丘腦弓狀核內(nèi)CBS參與慢性胰腺炎大鼠腹部痛覺過敏的機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　硫化氫（H2S）是繼NO、CO后被發(fā)現(xiàn)的第三種氣體信號(hào)分子，有報(bào)道顯示初級(jí)感覺神經(jīng)元中的 H2S能夠參與內(nèi)臟痛敏的形成，但其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的作用卻鮮為人知。此研究旨在探討下丘腦弓狀核（ARC）區(qū)內(nèi) H2S內(nèi)源性合成酶胱硫醚-β-合成酶（CBS）和胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）是否參與了慢性胰腺炎腹部痛覺過敏的形成及其可能的機(jī)制。
　　方法:
　　1.在180-200 g雄性SD大鼠胰管內(nèi)注射三硝基苯磺酸（T

2、NBS）誘導(dǎo)產(chǎn)生慢性胰腺炎（CP）模型。
　　2.運(yùn)用von Frey filament（VFF）評(píng)測(cè)正常大鼠和CP大鼠在ARC微量給藥前后的腹部機(jī)械痛反應(yīng)頻率。
　　3.運(yùn)用Western Blotting檢測(cè)胱硫醚-β-合成酶（CBS）、胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）、蛋白激酶 Cγ（PKCγ）、總 GluN2B和酪氨酸磷酸化的 GluN2B（p-GluN2B）在大鼠ARC中的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.T

3、NBS注射4周后能顯著上調(diào)ARC內(nèi)胱硫醚-β-合成酶（CBS）的表達(dá)，而沒有改變胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）的表達(dá)。
　　2.與對(duì)照組相比，CP雖然并沒有改變 GluN2B表達(dá)的總量，但顯著提高了GluN2B的酪氨酸磷酸化水平。CP也顯著上調(diào)了ARC內(nèi)PKCγ的表達(dá)。
　　3.ARC內(nèi)微量注射CBS的抑制劑O-（羧甲基）羥胺半鹽酸鹽（AOAA）能顯著降低CP大鼠的腹部疼痛，也翻轉(zhuǎn)了CP大鼠ARC中p-GluN2B和PKCγ上

4、調(diào)。
　　4.微量注射 PKC特異性抑制劑白屈菜赤堿（CC）能顯著減輕 CP大鼠的腹部痛覺過敏，并抑制p-GluN2B的增加。
　　5.微量注射NMDA受體拮抗劑D-AP5、GluN2B特異性拮抗劑艾芬地爾均能顯著降低CP大鼠的腹部痛覺過敏。
　　6.微量注射H2S供體NaHS能使正常大鼠產(chǎn)生腹部痛覺過敏。
　　結(jié)論:
　　總之，我們的數(shù)據(jù)表明，CP引起了 ARC內(nèi) CBS的上調(diào)，并可能通過 PKCγ介導(dǎo)了