自制α-硫辛酸緩釋片對兔動脈粥樣硬化的影響.pdf

1、隨著經(jīng)濟(jì)社會的發(fā)展，我國心血管疾病的發(fā)病率已經(jīng)排在各種疾病之首。心血管疾病是現(xiàn)在和將來很長一段時(shí)間內(nèi)人類必須面對的最重大的公共衛(wèi)生問題之一。其中，動脈粥樣硬化及其并發(fā)癥占了相當(dāng)大一部分。動脈粥樣硬化是以血管內(nèi)皮細(xì)胞（vascular endothelial cell，VEC）完整性破壞，巨噬細(xì)胞游移，平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞增生，以及細(xì)胞內(nèi)外脂質(zhì)積聚為主的一種病理過程。關(guān)于動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）的發(fā)病機(jī)制存在

2、多種學(xué)說。但AS的具體機(jī)制尚未完全闡明。 脂質(zhì)與冠心病的關(guān)系已被證實(shí)。大量流行病學(xué)資料顯示，動脈粥樣硬化的嚴(yán)重程度與血漿膽固醇水平呈正相關(guān)，低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）水平升高是動脈粥樣硬化及由動脈粥樣硬化所引起的心腦血管疾病的最重要的危險(xiǎn)因素。近年來研究證明，正常的LDL-C不能有效刺激巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)變成泡沫細(xì)胞，只有經(jīng)過修飾，主要是在機(jī)體氧化應(yīng)激狀態(tài)下，

3、被氧化成氧化低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein，Ox-LDL）才能刺激巨噬細(xì)胞很快轉(zhuǎn)變成泡沫細(xì)胞，從而有利于動脈粥樣硬化的發(fā)生。氧化應(yīng)激狀態(tài)下，血管壁內(nèi)過多生成的活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）能使內(nèi)皮下間隙的LDL氧化修飾生成Ox-LDL，這是動脈粥樣硬化病理過程中最重要的早期事件。所以氧化應(yīng)激和氧化低密度脂蛋白在動脈粥樣硬化中發(fā)揮著重要作用，抗氧化治療就成

4、為阻斷動脈粥樣硬化進(jìn)程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。 目前用于臨床的天然抗氧化劑主要有維生素C（Vitamin C，VitC）、維生素E（Vitamin E，VitE）和β-胡蘿卜素。維生素C為水溶性抗氧化劑，不容易與脂質(zhì)結(jié)合從而發(fā)揮抗脂質(zhì)氧化作用，VitE和β-胡蘿卜素為脂溶性抗氧化劑，其與氧自由基為可逆性結(jié)合，抗氧化能力較弱。為此迫切尋找一種更好的抗氧化劑。 Α-硫辛酸（α-Lipoic Acid，LA）是已知天然抗氧劑中效果最強(qiáng)的一

5、種抗氧化劑，是目前已知的唯一既可在水相又可在脂相中溶解的抗氧化劑，大量實(shí)驗(yàn)證明LA具有比VitC和VitE更為強(qiáng)大的抗氧化性。近年來，LA因其強(qiáng)大的抗氧化作用及其在糖尿病和糖尿病并發(fā)癥及缺血再灌注損傷等方面的治療作用倍受國際生物醫(yī)學(xué)界的關(guān)注。但是，目前有關(guān)硫辛酸對動脈粥樣硬化作用的動物實(shí)驗(yàn)報(bào)導(dǎo)極少，在國內(nèi)外罕見。 所以我們采用食餌性兔動脈粥樣硬化模型，以觀察自制硫辛酸緩釋片對動脈粥樣硬化的影響，探討其可能作用途徑，為早期防治動脈

6、粥樣硬化提供理論依據(jù)，同時(shí)為硫辛酸緩釋片臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 目的: 1.觀察硫辛酸對血脂的影響； 2.觀察硫辛酸對機(jī)體氧化應(yīng)激的影響； 3.觀察硫辛酸對Ox-LDL水平的影響； 4.觀察硫辛酸對動脈粥樣硬化的影響； 5.探討硫辛酸對動脈粥樣硬化的干預(yù)機(jī)制。 對象與方法: 1.研究對象 選擇健康新西蘭大白兔24只，雌雄不拘，體重（2.3-2.7）kg，喂養(yǎng)1周后隨

7、機(jī)分成3組，分別為正常組、模型組、硫辛酸組，每組8只。 2.實(shí)驗(yàn)方法 給予普通顆粒飼料喂養(yǎng)1周后，24只兔隨機(jī)分為3組，正常組、模型組、硫辛酸組各8只。 ①正常組：喂飼普通顆粒飼料。 ②模型組：用高脂飼料喂養(yǎng)，即在普通飼料中加入1%膽固醇和8%豬油。 ③硫辛酸組：用高脂飼料喂養(yǎng)，另外每只兔通過胃管給予硫辛酸300 mg/d。喂飼高脂飼料及預(yù)防性用藥12周，實(shí)驗(yàn)共13周。 清晨空腹耳靜脈采血

8、12 mL，兔血清甘油三脂（triacylglycerol，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL）、低密度脂蛋白膽固醇水平在珠江醫(yī)院檢驗(yàn)科由全自動生化分析儀完成。兔血清丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、Ox-LDL、內(nèi)皮素（end

9、othelium，ET）及一氧化氮（nitric oxide，NO）水平參照檢測試劑盒說明書進(jìn)行。 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所有資料均采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。正態(tài)分布資料的描述性統(tǒng)計(jì)分析采用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差（x±s），統(tǒng)計(jì)推斷主要采用單因素方差分析，均數(shù)的兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；偏態(tài)分布資料轉(zhuǎn)化為正態(tài)分布資料后進(jìn)行處理，如無適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)化方式則采用非參數(shù)檢驗(yàn)，兩組比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)，多組比較采用Kru

10、skal-Wallis H檢驗(yàn)。血清MDA、SOD、Ox-LDL、ET及NO水平之間的相關(guān)性采用簡單相關(guān)分析。探討硫辛酸對Ox-LDL的影響用協(xié)方差分析。本論文所有統(tǒng)計(jì)推斷檢驗(yàn)水準(zhǔn)均設(shè)為α=0.05。 結(jié)果: 2.1實(shí)驗(yàn)動物數(shù)量分析納入大白兔24只，分成3組，全部進(jìn)入結(jié)果分析，無脫失。 2.2各組兔血脂水平的比較喂飼高脂飼料后，模型組兔血清中TC、TG、LDL水平均顯著高于正常對照組（P<0.05），HDL水平顯

11、著低于正常對照組（P<0.05）。硫辛酸組兔血清中TC、TG、LDL水平均顯著低于模型組（P<0.05）。HDL水平與模型組比較差異無顯著性意義（P>0.05）。 2.3各組兔血清SOD、NO、MDA、ET-1、Ox-LDL水平的比較。模型組血清SOD和NO水平顯著低于正常對照組（P<0.05），MDA、ET-1及Ox-LDL含量顯著高于正常對照組（P<0.05）；硫辛酸組SOD和NO水平顯著高于模型組（P<0.05），MDA、

12、ET及Ox-LDL水平顯著低于模型組（P<0.05）。 2.4血清Ox-LDL與SOD、NO、MDA、ET-1水平的相關(guān)分析 Ox-LDL水平與SOD水平成顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.862，P=0.000）； Ox-LDL水平與MDA水平成顯著正相關(guān)（r=0.946，P=0.000）； Ox-LDL水平與NO水平成顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.906，P=0.000）； Ox-LDL水平與ET水平成顯著正相關(guān)（r=0.894，P=0.000

13、）。 2.5以LDL、MDA水平作為協(xié)變量，以分組作為因變量，以O(shè)x-LDL為反應(yīng)變量，做協(xié)方差分析：在剔除了LDL、MDA的影響后，硫辛酸可顯著降低Ox-LDL水平（F=8.564，P=0.002）。 結(jié)論: 本課題共入選24例研究對象，采用食餌性兔動脈粥樣硬化模型，探討自制α-硫辛酸緩釋片是否對動脈粥樣硬化具有早期干預(yù)作用，得出以下結(jié)論： 1、硫辛酸具有降低TC、TG、LDL的作用。 2、硫辛