新型盆底補(bǔ)片生物學(xué)評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:檢測(cè)新型生物交聯(lián)劑京尼平對(duì)豬脫細(xì)胞膀胱(urinarybladdermatrix,UBM)體外生物學(xué)性能的影響及補(bǔ)片植入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物家兔腹部和陰道后生物相容性和生物力學(xué)性能,為新型的盆底功能重建補(bǔ)片的臨床應(yīng)用提供前期試驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　?、俨捎帽砻婊钚詣?酶消化法對(duì)豬膀胱進(jìn)行脫細(xì)胞處理后,用0.625％京尼平溶液交聯(lián)UBM72小時(shí)。通過HE染色及掃描電鏡進(jìn)行組織形態(tài)觀察,并對(duì)交聯(lián)前后的脫細(xì)胞豬膀胱進(jìn)行厚度、吸水性、體

2、外膠原酶降解性能以及生物力學(xué)性能檢測(cè),以L929細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)細(xì)胞,采用MTT法評(píng)估材料的細(xì)胞毒性。
　?、趯⒓彝梅譃?組,每組15只,分別將UBM(A)、交聯(lián)型UBM(B)、聚丙烯網(wǎng)片(C)、復(fù)合交聯(lián)型UBM(D)、復(fù)合UBM(E),植入家兔腹壁,以假手術(shù)組為對(duì)照。分別于植入后1,2,4,8,12周取材,通過HE染色進(jìn)行組織學(xué)觀察,采用RT-PCR技術(shù)動(dòng)態(tài)檢測(cè)IFN-γ,IL-2,IL-4及IL-10mRNA的表達(dá)水平。
　　

3、③健康雌性新西蘭大白兔40只,隨機(jī)分為2組。分別將聚丙烯網(wǎng)片、京尼平交聯(lián)型UBM植入家兔的腹直肌表面及陰道直腸間隙,植入12周時(shí)取材,進(jìn)行組織學(xué)反應(yīng)和生物力學(xué)性能評(píng)估。
　　結(jié)果:
　?、倬┠崞浇宦?lián)豬脫細(xì)胞膀胱后呈深藍(lán)色,保持了天然組織構(gòu)架的完整,膠原纖維更加致密,吸水性提高,力學(xué)性能良好,UBM在抗酶解實(shí)驗(yàn)第7天已完全降解,交聯(lián)型UBM在第28天降解率2%。交聯(lián)前后UBM的細(xì)胞毒性為0~1級(jí)。
　?、趦蓮?fù)合材料組均出

4、現(xiàn)侵蝕反應(yīng),復(fù)合UBM材料組炎癥評(píng)分顯著高于其他各組(P<0.05);聚丙烯網(wǎng)片組新生血管形成、成纖維細(xì)胞增殖評(píng)分高于其他各組(P<0.05);各材料組成纖維細(xì)胞增殖顯著高于假手術(shù)組(P<0.05)。UBM材料降解速度最快,術(shù)后12周時(shí)UBM材料完全降解,而交聯(lián)型UBM材料無(wú)降解。交聯(lián)型UBM材料組的IFN-γ,IL-2,IL-4及IL-10mRNA的表達(dá)水平在每個(gè)觀察時(shí)間點(diǎn)上均與假手術(shù)組接近。
　?、劬郾╆幍澜M有50%出現(xiàn)侵蝕

5、反應(yīng),聚丙烯腹部組及交聯(lián)型UBM組未見侵蝕現(xiàn)象。植入陰道的聚丙烯補(bǔ)片有33%消失,腹部的聚丙烯補(bǔ)片全部可見;植入腹部的交聯(lián)型UBM補(bǔ)片有6%消失,陰道的交聯(lián)型UBM補(bǔ)片有53%消失。所有補(bǔ)片和腹直肌或陰道粘膜均有粘連,補(bǔ)片不同程度的收縮;聚丙烯補(bǔ)片粘連更致密收縮更明顯。
　　④將兩個(gè)植入部位累加統(tǒng)計(jì),與聚丙烯比較,交聯(lián)型UBM誘導(dǎo)慢性炎癥反應(yīng)輕,炎癥評(píng)分低(P=0.021),新生血管形成(P=0.000)和成纖維細(xì)胞增殖(P=0.

6、008)評(píng)分更高。從植入部位觀察,聚丙烯陰道組比腹部組有更高的炎癥反應(yīng)評(píng)分(P=0.001),而新生血管形成和成纖維細(xì)胞增殖無(wú)顯著差異(P>0.05)。
　　⑤京尼平交聯(lián)型UBM植入腹部和陰道12周后,力學(xué)性能無(wú)下降,而聚丙烯植入陰道后抗拉強(qiáng)度增強(qiáng)、彈性模量增加。兩種材料植入同一部位比較,腹部植入后,聚丙烯的抗拉強(qiáng)度、斷裂伸長(zhǎng)率、斷裂強(qiáng)度均高于交聯(lián)型UBM(P<0.05),但兩者的彈性模量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05);陰道植入后,