OPG-RANKL系統(tǒng)在大數(shù)鼓室硬化發(fā)病機(jī)制中的調(diào)控作用.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2 0 0 q 級(jí)碩士學(xué)位論文O P G ／R A N K L 系統(tǒng)在大鼠鼓室硬化發(fā)病機(jī)制中的調(diào)控作用T h er e g u l a t i v e e f f e c t o f O P G ／R A N K L s y s t e mo n t h ep a t h o g e n e s iS o f e x p e r i m e n t a I t y m p a n o s c 1e r o s iS inr

2、a t S課題來源：廣東省自然科學(xué)基金( 項(xiàng)目編號(hào)：1 0 1 5 1 0 0 8 0 0 4 0 0 0 0 0 5 )專 業(yè) 名 稱學(xué)位申請(qǐng)人指 導(dǎo) 教 師答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)成員論文評(píng)閱人耳鼻咽喉一頭頸外科黃宏明吳佩娜鄭億慶教授文衛(wèi)平教授汪 建教授張思毅教授姜 捷教授2 0 1 2 年O 5 月1 5 日 廣州中文摘要鼓室硬化發(fā)病機(jī)制的作用。如能證實(shí)0 P G ／I 洲K L 系統(tǒng)在鼓室硬化的發(fā)病機(jī)制中起到?jīng)Q定性作用，那么通過

3、外部的拮抗性干預(yù)將有望阻止甚至逆轉(zhuǎn)鼓室硬化的病理過程，對(duì)鼓室硬化的防治具有重要的意義。目的：鼓室內(nèi)注射肺炎鏈球菌建立S D 大鼠鼓室硬化模型，探討O P G ／R A N K L 系統(tǒng)在大鼠鼓室硬化發(fā)病機(jī)制中的調(diào)控作用。方法：本實(shí)驗(yàn)分兩步進(jìn)行，第一步建立大鼠鼓室硬化模型，第二步對(duì)大鼠鼓室硬化模型的聽泡標(biāo)本進(jìn)行蘇木精一伊紅( h e m a t o x y l i ne o s i n ，H E ) 染色和免疫組化染色。1 ．購買3 0

4、只健康的成年雄性S D 大鼠，隨機(jī)分為兩組，造模組2 0 只，對(duì)照組l O 只，肌注安定針和氯胺酮針進(jìn)行全身麻醉。在造模組大鼠的右耳( 2 0耳) 鼓室內(nèi)接種濃度為1 ×1 0 8 C F U ／m 1 的肺炎鏈球菌懸液進(jìn)行鼓室硬化造模，對(duì)照組大鼠的右耳( 1 0 耳) 不干預(yù)作為空白對(duì)照。分別于造模后第l 周、2 周、4周、6 周、8 周在全身麻醉下用耳科顯微鏡下觀察并評(píng)估所有大鼠右耳的鼓膜充血程度、鼓室積膿程度和鼓室硬化程

5、度。2 ．于鼓室硬化造模后的第8 周，全麻下處死所有大鼠，收集造模組大鼠右耳中有鼓室硬化形成的聽泡標(biāo)本作為鼓室硬化組和對(duì)照組大鼠右耳的正常聽泡標(biāo)本作為正常組。以上聽泡標(biāo)本用％4 多聚甲醛固定，然后用1 0 ％乙二胺四乙酸鈉( E D T A ) 溶液脫鈣，脫鈣充分后用石蠟包埋并做層厚為5 I lm 的切片。分別用H E 染色觀察鼓室粘膜的病理學(xué)改變和免疫組化染色檢測鼓室粘膜中的O P G 和R A N K L 蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：1 ．