秋葵素對糖尿病腎病早期大鼠蛋白尿以及足細(xì)胞裂孔膜蛋白nephrin表達(dá)的影響.pdf

1、目的：本文以傳統(tǒng)中醫(yī)學(xué)理論為指導(dǎo)，通過動物實驗研究，觀察秋葵素（黃蜀葵花總黃酮）對糖尿病腎病早期大鼠蛋白尿的影響，并探討其可能作用的分子機理。
　　 材料和方法：雄性SD大鼠40只，隨機分成4組：正常對照組(NS)、模型組(DN)、秋葵素低劑量組(LTFA)、秋葵素高劑量組(HTFA)，采用腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)造模，大鼠造模成功后即開始灌服低和高劑量（50和200mg/kg/d）秋葵素的羧甲基纖維素（CMC,30mg/m

2、l）溶液，正常對照組灌服等量CMC溶液。連續(xù)給藥24周，于末次給藥24h后留取各組大鼠24小時尿液，全自動生化分析儀測定各組大鼠24小時尿蛋白定量及尿微量白蛋白，酶聯(lián)免疫吸附法測定各組大鼠尿肌酐值。腎臟組織切片后通過電子顯微鏡、HE染色及PAS染色觀察各組大鼠腎臟組織病理改變。蛋白免疫印跡及實時定量PCR法檢測各組大鼠腎臟組織nephrin蛋白水平和mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：實驗結(jié)果顯示DN組大鼠和NS組相比其24h-UTP

3、顯著增加，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.05。低劑量與高劑量的秋葵素干預(yù)糖尿病腎病早期模型大鼠后24h-UTP、UrinarymAlb/Cr與DN組比較均降低，但僅HTFA組與DN組比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；腎臟組織切片后電鏡及HE染色結(jié)果顯示：DN組腎小球基底膜增厚，足細(xì)胞排列紊亂，數(shù)目減少，足突增寬、融合。低劑量與高劑量的秋葵素干預(yù)后腎小球基底膜病變減輕，細(xì)胞外基質(zhì)減少，足細(xì)胞數(shù)目增多，足突融合減輕；運用圖像分析軟件計

4、算PAS染色陽性面積與每個腎小球正切面積的比值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)DN組大鼠腎臟組織PAS染色陽性面積與每個腎小球正切面積的比值顯著增加（P＜0.05），低劑量與高劑量的秋葵素干預(yù)均能降低DN大鼠腎臟組織PAS染色陽性面積與每個腎小球正切面積的比值，但前者與DN組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，而后者與DN組比較具有顯著性差異(P＜0.05)；腎臟組織蛋白免疫印跡及實時定量PCR結(jié)果表明：低劑量與高劑量的秋葵素干預(yù)糖尿病腎病早期模型大鼠后腎