T細(xì)胞來源Exosomes調(diào)節(jié)妊娠丟失孕鼠母胎界面趨化因子及粘附分子表達(dá)的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師( 或指導(dǎo)小組) 的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表． 與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)的法律責(zé)任。研究生簽名：與弓扳導(dǎo)師簽章： ＼， I r ，＼∥ ，，馓諷℃Vl

2、二級(jí)學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)蓋章：年 月 日河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注等內(nèi)容外，文中不包含其他人已發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：揚(yáng)孑圾導(dǎo)師簽章：氮批e ≥ 月 日中文摘要T 細(xì)胞來源E x o s o m e s 調(diào)節(jié)妊娠丟失孕鼠母胎界面趨化因子及粘附分子表達(dá)的研究摘 要目的：母胎界面免疫耐受異常是不明原因反復(fù)性

3、自然流產(chǎn)( U R S A ) 發(fā)生的重要機(jī)制。胚胎具有同種異體移植及自體移植的雙重特性，胎兒及其附屬物不被母體排斥并可在子宮內(nèi)發(fā)育成熟，需要母體必須形成母胎免疫耐受。一旦這種免疫耐受出現(xiàn)異常則可引發(fā)流產(chǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，母胎免疫耐受的建立和維持需由多種細(xì)胞和細(xì)胞因子介質(zhì)的參與和協(xié)同作用。因此，研究母．胎免疫耐受調(diào)節(jié)的確切機(jī)制，尋找能夠誘導(dǎo)母體對(duì)胎兒形成免疫耐受的治療方法，是開發(fā)防治U R S A 藥物、明確其免疫機(jī)理及指導(dǎo)臨床合理應(yīng)用的重要

4、研究方面。目前通過淋巴細(xì)胞免疫治療從而誘導(dǎo)母體對(duì)同種異體胚胎抗原形成免疫耐受在U R S A 的臨床防治中起到積極作甩。但是淋巴細(xì)胞穩(wěn)定性差，不易保存，需要新鮮制備，加之操作標(biāo)準(zhǔn)不一，臨床療效不穩(wěn)定，限制了臨床上的推廣。最近的研究發(fā)現(xiàn)，T 細(xì)胞在生長增殖過程中可分泌釋放一種稱為E x o s o m e s 的膜性微囊結(jié)構(gòu)。它恰恰克服了淋巴細(xì)胞免疫治療的局限性。本研究采用流產(chǎn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，以分析T 細(xì)胞來源的E x o s o m e

5、s 調(diào)節(jié)母胎界面趨化因子( C X C R 4 ／S D F ．1 、C X C R 6 ) 以及粘附分子( C D 2 9 、C D l 0 6 )的表達(dá)，探討其誘導(dǎo)母胎免疫耐受的相關(guān)免疫學(xué)機(jī)制。方法：1 無關(guān)的雄性個(gè)體脾細(xì)胞及E x o s o m e s 的制備和初步鑒定：處死B A L B ／c 雄鼠，在無菌環(huán)境下解剖取脾，在獲得單個(gè)細(xì)胞懸液后，采用蔗糖密度梯度離心以及超濾技術(shù)獲得E x o s o m e s ；通過掃描、透射

6、電鏡觀察E x o s o m e s 的形態(tài)結(jié)構(gòu)，用紫外分光光度法測(cè)定其蛋白含量。2 建立流產(chǎn)動(dòng)物模型及實(shí)驗(yàn)分組：將雌雄小鼠按2 ：l 合籠交配；C B A ／J ( 早) ×B A L B ／c ( 8 ) 為正常妊娠對(duì)照動(dòng)物模型( C o n t r o l 組) ，C B A ／J ( 早) x D B A ／2 ( 艿) 為流產(chǎn)動(dòng)物模型。再將U R S A 孕鼠隨機(jī)分為3 組：1 ．妊娠丟失組( U R S A 組，