新生小鼠不同途徑感染MCMV聽力損傷及內(nèi)耳病理變化的比較研究.pdf

1、目的:分別經(jīng)大腦、內(nèi)耳、腹腔3個(gè)不同部位接種小鼠巨細(xì)胞病毒(murinecytomegalovirus,MCMV),建立MCMV感染一聽力損傷的BALB/C小鼠動(dòng)物模型,同時(shí)應(yīng)用更昔洛韋(ganciclovir,GCV)干預(yù),通過腦干聽覺誘發(fā)電位(auditorybrainstem response,ABR)和內(nèi)耳前庭、蝸管相關(guān)結(jié)構(gòu)免疫炎癥病理變化的比較,以明確哪種感染方式建立動(dòng)物模型能夠引起相對(duì)較明顯的聽力損傷及內(nèi)耳病理變化,為今后巨

2、細(xì)胞病毒感染-聽力損傷發(fā)病機(jī)制及新的治療藥物的研究提供理想的研究平臺(tái)。
　　 方法:新生BALB/C小鼠根據(jù)MCMV接種部位的不同,按窩隨機(jī)分為腦內(nèi)組、內(nèi)耳組(均取左側(cè)耳為接種操作耳)、腹腔組3組,其中每組平行設(shè)正常對(duì)照組(接種部位注射10μl無菌NS)、病毒組(接種部位注射TCID50為104.31/0.1ml的MCMV病毒懸液10μl)、治療組3個(gè)亞組(MCMV接種方法同病毒組,接種MCMV后第2d天始,腹腔注射GCV60m

3、g/kg.d,連用2w),每組8只(內(nèi)耳組中的各個(gè)亞組每組16只)。GCV治療2w后,在聲電屏蔽下檢測小鼠ABR,然后將小鼠斷頭處死,取出兩側(cè)聽泡,分別提取MCMV-DNA、石蠟切片后,行PCR分析和組織病理學(xué)觀察。
　　 結(jié)果:
　　 1.經(jīng)腦內(nèi)接種MCMV病毒組小鼠,內(nèi)耳MCMV-DNA PCR電泳均出現(xiàn)陽性條帶;經(jīng)內(nèi)耳接種MCMV病毒組小鼠接種MCMV耳內(nèi)耳異亦出現(xiàn)陽性條帶,而對(duì)側(cè)耳未見陽性結(jié)果;經(jīng)腹腔接種MCMV

4、病毒組小鼠亦未見陽性結(jié)果。另外,經(jīng)腦內(nèi)、內(nèi)耳接種MCMV治療組內(nèi)耳(內(nèi)耳接種途徑為接種MCMV耳)陽性條帶亮度與病毒組相比變?nèi)酢?br>　　 2.經(jīng)腦內(nèi)接種MCMV病毒組、經(jīng)內(nèi)耳接種MCMV病毒組(接種MCMV耳)小鼠與正常對(duì)照組相比,ABRⅠ波潛伏期延長、波幅降低(P＜0.05),差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而內(nèi)耳接種方式接種MCMV耳對(duì)側(cè)耳(P＞0.05),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;經(jīng)腹腔接種MCMV病毒組與正常對(duì)照組相比(P＞0.05),差異無

5、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外,經(jīng)腦內(nèi)、內(nèi)耳接種MCMV治療組(內(nèi)耳接種途徑為接種MCMV耳)與病毒組相比,ABRⅠ波潛伏期縮短、波幅升高(P＜0.05),差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3.經(jīng)腦內(nèi)接種MCMV病毒組、經(jīng)內(nèi)耳接種MCMV病毒組(接種MCMV耳)小鼠與正常對(duì)照組相比,內(nèi)耳前庭膜明顯增厚伴有較多的淋巴細(xì)胞浸潤、蝸管頂部分泌表皮層纖維化改變明顯,而內(nèi)耳接種方式接種MCMV耳對(duì)側(cè)耳前庭膜與蝸管未出現(xiàn)上述病理變化;經(jīng)腹腔接種MCMV病毒組與

6、正常對(duì)照組相比,亦未出現(xiàn)上述類似的前庭膜與蝸管的病理變化。另外,經(jīng)腦內(nèi)、內(nèi)耳接種MCMV治療組(內(nèi)耳接種途徑為接種MCMV耳)與病毒組相比,前庭膜與蝸管亦無上述明顯組織病理改變。
　　 結(jié)論:
　　 1.腦內(nèi)接種MCMV可引起雙側(cè)內(nèi)耳MCMV感染并誘發(fā)炎癥反應(yīng)。
　　 2.腦內(nèi)接種MCMV可導(dǎo)致雙側(cè)耳明顯的聽力損傷。
　　 3.GCV可通過抑制內(nèi)耳CMV復(fù)制從而減輕其對(duì)內(nèi)耳的損害,而對(duì)聽力損傷的惡化起到一