殼聚糖衍生物基因遞送系統(tǒng)的構(gòu)建及其生物安全性初步研究.pdf

1、殼聚糖是一種具有良好生物相容性、生物可降解性、低毒的天然陽離子多糖,這些性質(zhì)使它成為很有應(yīng)用前景的非病毒基因載體.但是,正如其它非病毒載體一樣,殼聚糖基因載體的低轉(zhuǎn)染效率和低選擇性成為它未來臨床實(shí)驗(yàn)的巨大障礙.因此,開發(fā)具有較高性能的殼聚糖衍生物載體顯得勢(shì)在必行.而且,由于其發(fā)展前途必然是用于人體,所以其生物安全性必須得到評(píng)價(jià). 本研究工作主要包括以下內(nèi)容: 以一種新的方法合成了殼聚糖-L-精氨酸.通過縮合劑EDC·HC

2、I、NHS將Fmoc-Arg(pbf)-OH,結(jié)合到殼聚糖上并成功脫除保護(hù)基團(tuán),生成了具有一定取代度的殼聚糖-L-精氨酸,所做的表征證明了這一點(diǎn).所得到的殼聚糖-L-精氨酸側(cè)鏈更加規(guī)整. 對(duì)殼聚糖、十六烷基化殼聚糖、殼聚糖-L-精氨酸與DNA的復(fù)合物進(jìn)行了表征,對(duì)它們介導(dǎo)質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染血管平滑肌細(xì)胞進(jìn)行了研究.對(duì)復(fù)合物進(jìn)行了放射性同位素<'99>Tc<'m>的標(biāo)記以確定進(jìn)入細(xì)胞的比率.轉(zhuǎn)染K562細(xì)胞并計(jì)算細(xì)胞陽性率來近似表示轉(zhuǎn)