GM-1對原代培養(yǎng)神經(jīng)元類缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文GM-1對原代培養(yǎng)神經(jīng)元類缺血再灌注損傷的影響姓名：楊琨申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：劉瑞珍20060518山西醫(yī)辯文學(xué)磺士學(xué)位論文予缺血組相同條件造模。3 、檢測指標(biāo)：檢測①細(xì)胞存活率：在9 6 孔培養(yǎng)板中加入M T T( 四噻唑藍(lán)) 試劑作用4 h 然后上酶標(biāo)儀測4 9 0 n m 處的吸光值( O D ) ，用以檢測神經(jīng)元存活率；②凋亡細(xì)胞光學(xué)檢測法：按凋亡細(xì)胞光學(xué)檢測試劑盒說明操作，加入染色劑

2、等，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞染色情況，其中深染的為陽性細(xì)胞。⑧流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率：用胰酶消化法將貼壁細(xì)胞成為細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞密度，加入磷脂酰結(jié)合蛋白v ( A n n e x i nV - F I T C ) 及碘化丙啶( P I ) 1 0 pI ，上流式細(xì)胞儀檢測。4 、統(tǒng)計學(xué)分析：數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( X ±S ) 表示，用S P S S l 2 ．0 統(tǒng)計軟件，各組問均數(shù)比較采用t 檢驗和方差分析S N

3、K 法檢驗。P0 ．0 5 ) ，而流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率顯示實驗組低于缺血組( P < o ．0 5 ) ；在隨后的不同時問點實驗組的細(xì)胞活性顯著高于缺血組，凋亡率顯著低于缺血組( P < o ．0 5 、P < 0 ．0 1 ) 。結(jié)論：類缺血再灌注可有效造成培養(yǎng)神經(jīng)元的凋亡，在2 4 h 內(nèi)隨著再灌注時間的延長凋亡率逐漸增高；G M 一1 可保護(hù)類缺血再灌注后大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元的損傷，作用從再灌后l h 即可出現(xiàn)，