Th和Tc亞群在肝移植術(shù)后巨細(xì)胞病毒感染中的應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:探討肝移植術(shù)后巨細(xì)胞病毒(HCMV)感染發(fā)病受者外周血Th和Tc類細(xì)胞的平衡狀態(tài),探明Th和Tc類細(xì)胞在HCMV感染發(fā)病中的作用。同時(shí)檢測(cè)HCMV感染發(fā)病受者CD8<'+>T細(xì)胞表面CD38表達(dá)水平的變化。 方法: 1.HCMV感染發(fā)病受者與未感染HCMV受者按常規(guī)方法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs),并用佛泊脂(PMA)、離子酶素(Ionomycin)和莫能酶素(Monesin)進(jìn)行刺激。然后,采用雙色流式細(xì)胞

2、術(shù)分析HCMV感染發(fā)病受者與未感染HCMV受者CD4<'+>T細(xì)胞中Thl(CD4<,+>IFN-r<,+>)和Th2(CD4<'+>IL-4<'+>)細(xì)胞的百分率,CD8<'+>T細(xì)胞中Tc1(cD8<'+>IFN-r<'+>和Tc2(CD8<'+>IL-4<'+>)細(xì)胞的百分率。觀察HCMV感染發(fā)病受者Th1/Th2、Tcl/Tc2比值的變化。 2.將研究對(duì)象外周血淋巴細(xì)胞與相應(yīng)熒光標(biāo)記的單克隆抗體反應(yīng),經(jīng)洗滌、固定后用流式

3、細(xì)胞儀檢測(cè)CD8<'+>T細(xì)胞表面CD38的表達(dá)量。 結(jié)果: 1.肝移植術(shù)后HCMV感染發(fā)病受者T淋巴細(xì)胞亞群中Th1細(xì)胞(CD4<'+>IFN-Y<'+>)及Tel細(xì)胞(CD8<'+>IFN-Y<'+>)百分率較未感染HCMV受者降低。 2.肝移植術(shù)后HCMV感染發(fā)病受者T淋巴細(xì)胞亞群中Th2細(xì)胞(CD4<'+>IL-4<'+>)及 Tc2 細(xì)胞(CD8<'+>IL-4<'+>)百分率與未感染 HCMV 受者相

4、比差異無(wú)顯著性。 3.肝移植術(shù)后HCMV感染發(fā)病受者T淋巴細(xì)胞亞群CD4<'+>/CD8<'+>比值降低,與未感染HCMV受者相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 4.肝移植術(shù)后HCMV感染發(fā)病受者外周血CD38<'+>CD8<'+>的表達(dá)水平明顯高于未感染HCMV受者。 結(jié)論: 1.雙色流式細(xì)胞術(shù)定量分析淋巴細(xì)胞表面CD38<'+>CD8<'+>的表達(dá)水平對(duì)于監(jiān)測(cè) HCMV 感染是較靈敏且特異的指標(biāo)之一。 2.肝

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