VEGF受體與內(nèi)皮抑素在血管瘤中的表達及DDRT-PCR方法的應(yīng)用.pdf

1、　　目的：
　　通過半定量RT-PCR方法,檢測VEGF的兩種受體在血管瘤組織中的表達情況以及它們同內(nèi)皮抑素之間可能存在的關(guān)系。同時,建立血管瘤組織同自身正常皮膚組織比較的差異顯示PCR研究方法。
　　方法：
　　實驗組為15例血管瘤患者的手術(shù)切除標本,對照組為10例大隱靜脈的手術(shù)切除樣本。檢測指標為KDR、Flt-1和endostatin,內(nèi)參照為β-actin。應(yīng)用UNIQ-10總RNA抽提試劑盒提取樣本總RNA,

2、然后進行半定量反轉(zhuǎn)錄PCR。將所得產(chǎn)物電泳條帶的亮度通過圖象分析系統(tǒng)轉(zhuǎn)化為同β-actin條帶亮度的比值,然后進行統(tǒng)計分析。DDRT-PCR方法被用來檢測血管瘤同自身正常皮膚組織的基因表達有無差異,可疑的差異條帶被分離、回收、再擴增后測序。
　　結(jié)果：
　　血管瘤組的Flt-1、KDR表達水平(0.6776±0.0286,0.6303±0.0249)較大隱靜脈組(0.4668±0.0312,0.4284±0.026)為高,P

3、值均小于0.05,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；同組中Flt-1同KDR之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；內(nèi)皮抑素在兩組中都只是在部分樣本中才檢測到,難以比較。利用DDRT-PCR方法得到幾個可能的差異片段,并選取其中的一個進行了測序。
　　結(jié)論：
　　KDR、Flt-1在血管瘤組織中的表達上調(diào)提示,在血管瘤中VEGF及其受體的作用是增強的,VEGF可能在血管瘤的病理過程中起到重要的作用；內(nèi)皮抑素在兩組中都難以檢出,提示內(nèi)皮抑素表