食管癌組織Fas、FasL蛋白表達(dá)與Fas基因甲基化相關(guān)性分析的研究.pdf

1、目的：觀察食管鱗狀細(xì)胞癌癌灶組織、癌旁正常組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)及非轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中Fas、FasL蛋白的表達(dá)情況以及Fas基因甲基化狀態(tài)，研究三者之間的相關(guān)性，探討它們在食管鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其臨床意義。
　　 方法：收集經(jīng)手術(shù)治療的食管鱗狀細(xì)胞癌患者的癌組織標(biāo)本54例，癌旁正常組織標(biāo)本54例，轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)35例，非轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)19例，應(yīng)用免疫組化S-P染色技術(shù)測定以上組織Fas、FasL蛋白的表達(dá)情況，應(yīng)用甲基化特異性PCR(M

2、ethylation-specificPCR，MSP)法檢測以上組織中Fas基因甲基化狀態(tài)。結(jié)合臨床及病理資料對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果：1．Fas蛋白在食管癌組織中陽性表達(dá)率為55.6％(30/54)低于癌旁組織的85.2%(46/54)(P＜0.05)。高分化食管鱗癌Fas蛋白的陽性表達(dá)率為84.2%(16/19)，中分化為44.4%(12/27)，低分化為25.0%(2/8)，高分化鱗癌Fas蛋白陽性表達(dá)率明顯

3、高于中低分化者(P＜0.05)。食管鱗癌各病理類型Fas蛋白表達(dá)的陽性率為髓質(zhì)型59.3%(16/27)、蕈傘型53.8%(7/13)、潰瘍型50.0%(3/6)和縮窄型50.0%(4/8)，各型間無顯著性差異(P＞0.05)。各浸潤深度(T分期)：T2期Fas的陽性表達(dá)率為59.3%(16/27)、T3期52.0%(13/25)、T4期50.0%(1／2)(P＞0.05)；伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌組織Fas蛋白表達(dá)率為38.1%(8/21)，

4、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者為66.7%(22/33)(P＜0.05)；在不同臨床分期Fas蛋白的陽性表達(dá)率：Ⅱa期61.9%(13/21)、Ⅱb期50.0%(5/10)、Ⅲ期52.2%(12/23)(P＞0.05)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析Fas蛋白的陽性表達(dá)與年齡、性別無關(guān)。2.FasL蛋白在食管鱗癌組織中陽性表達(dá)率為81.5%(44/54)，高于癌旁組織的48.1%(26/54)(P＜0.05)。不同分化程度食管鱗癌FasL蛋白陽性表達(dá)率為：高分化57.9

5、%(11/19)、中分化92.6%(25/27)、低分化100%(8/8)，F(xiàn)asL蛋白陽表達(dá)性率在高分化癌中明顯低于中低分化者(P＜0.05);FasL蛋白陽性表達(dá)在髓質(zhì)型為81.5%(22/27)、蕈傘型84.6%(11/13)、潰瘍型83.3%(5/6)、縮窄型75.0%(6/8)，組間無顯著性差異(P＞0.05)；不同T分期食管鱗癌FasL蛋白的陽性表達(dá)率：T2期66.7%(18/27)、T3期96.0%(24/25)、T4期1

6、00%(2/2)，T2期低于T3、T4期(P＜0.05)；伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移食管鱗癌患者FasL蛋白陽性表達(dá)率為100%(21/21)，不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者為69.7%(23/33)(P＜0.05)；食管鱗癌各臨床分期FasL蛋白的陽性表達(dá)率為：Ⅱa期71.4%(15/21)、Ⅱb期90.0%(9/10)、Ⅲ期87.0%(20/23)(P＞0.05)。FasL蛋白陽性表達(dá)與年齡、性別無關(guān)。3．食管癌組織Fas基因甲基化率為61.1%(33/54

7、)，高于癌旁組織22.2%(12/54)(P＜0.05)。不同分化程度食管鱗癌Fas基因甲基化率為：高分化63.2%(12/19)、中分化59.3%(16/27)、低分化62.5%(5/8)，組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；不同大體病理類型食管鱗癌髓質(zhì)、蕈傘、潰瘍和縮窄各型間Fas蛋基因甲基化率分別為59.3%(16/27)、61.5%(8/13)、66.7%(4/6)和62.5%(5/8)，組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.

8、05)；不同浸潤深度(T分期)食管鱗癌Fas基因甲基化率為：T2期59.3%(16/27)、T3期60.0%(15/25)、T4期100%(2/2)(P＞0.05);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者食管鱗癌Fas基因甲基化率為：61.9%(13/21)，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者為：60.6%(20/33)(P＞0.05)；各臨床分期食管鱗癌組織Fas基因甲基化率分別為：Ⅱa期61.9%(13/21)、Ⅱb期60.0%(6/10)、Ⅲ期60.9%(14/23)，無

9、統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。Fas基因甲基化與年齡、性別無關(guān)。4．轉(zhuǎn)移組淋巴結(jié)Fas蛋白陽性表達(dá)率為33.3%(7/21)，低于非轉(zhuǎn)移組淋巴結(jié)Fas蛋白陽性表達(dá)率66.7%(22/33)(P＜0.05)；轉(zhuǎn)移組淋巴結(jié)FasL蛋白陽性表達(dá)率為71.4%(15/21)，高于非轉(zhuǎn)移組淋巴結(jié)FasL蛋白陽性表達(dá)率42.4%(14/33)(P＜0.05)；轉(zhuǎn)移組淋巴結(jié)Fas基因甲基化率為57.1%(12/21)，高于非轉(zhuǎn)移組淋巴結(jié)Fas基因甲基化

10、率24.2%(8/33)(P＜0.05)。5．Fas與FasL蛋白表達(dá)的相關(guān)性系數(shù)r=-0.33，P＜0.05;Fas蛋白表達(dá)與Fas基因甲基化的相關(guān)性系數(shù)r=-0.56，P＜0.05兩者具有顯著相關(guān)性；FasL蛋白表達(dá)與Fas基因甲基化無相關(guān)性（r=-0.09，P＞0.05）。腫瘤Fas蛋白表達(dá)下調(diào)可能主要由Fas基因甲基化所致。
　　 結(jié)論：1．食管鱗癌組織中Fas蛋白表達(dá)下調(diào)，F(xiàn)asL蛋白表達(dá)上調(diào)，F(xiàn)as基因呈高甲基化表現(xiàn)

11、，且Fas與FasL蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，F(xiàn)as表達(dá)與Fas基因高甲基化表現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)。2、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中Fas蛋白表達(dá)下調(diào)，F(xiàn)asL蛋白表達(dá)上調(diào)，F(xiàn)as基因呈高甲基化表現(xiàn)。3、食管鱗癌組織中Fas蛋白的陽性表達(dá)與分化程度，有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，高分化鱗癌的Fas蛋白表達(dá)高于中低分化者(P＜0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移食管鱗癌Fas蛋白表達(dá)低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P＜0.05)，F(xiàn)as蛋白表達(dá)與患者性別、年齡、病理類型、浸潤深度及臨床分期無關(guān)。4、食管