化療藥物殺傷原代胃癌細胞效應與hTERT mRNA及Bcl—2表達關(guān)系的研究.pdf

1、目的： 研究化療藥物對原代胃癌細胞的體外殺傷效應，并觀察其效應與胃癌組織中端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶mRNA（human telomerase reverse transcriptase hTERT mRNA）和凋亡抑制基因Bc1-2蛋白表達的關(guān)系。 方法： 取手術(shù)切除的新鮮胃癌組織標本，在無菌條件下，自漿膜面切開腫瘤，從腫瘤生長活躍、無壞死變性的部位取材，制備含活細胞濃度（3～5）×10<'5>／ml的單細胞懸液，并分別加入血漿峰值藥物濃

2、度的紫杉醇（Tax）、順鉑（DDP）、阿霉素（ADM）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、絲裂霉素（MMC）培養(yǎng)48小時。用臺盼藍染色法和MTT法檢測經(jīng)上述藥物作用后腫瘤細胞活力及代謝活性的變化。取胃癌組織制成石蠟切片，用原位雜交技術(shù)檢測hTERT mRNA的表達；用免疫組化檢測Bc１-2蛋白的表達。 結(jié)果： 68例胃癌標本經(jīng)MTI比色法藥敏實驗成功者60例。經(jīng)化療藥物作用后，體外培養(yǎng)的胃癌原代培養(yǎng)細胞呈現(xiàn)不同程度形態(tài)和代謝活動的變化

3、。MTT結(jié)果顯示，不同個體的腫瘤細胞對不同化療藥物的敏感性不同，所測藥物對胃癌細胞的平均抑制率從高到低依次為：Tax［（40.6％±6.9）］、CDDP［（38.4％±7.8）］、5-FU［（38.9％±9.2）］、ADM［（31.6％±8.5）］、MMC［（28.9％±9.8）］。Tax、CDDP及5-FU的平均抑制率明顯高于ADM及MMC（P<0.05）。化療藥物對原代胃癌細胞的殺傷效應與胃癌的組織病理學類型及分化程度相關(guān)性有統(tǒng)計學

4、意義，而與胃癌的TNM分期及是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。本組60例胃癌組織中hTERT mRNA與Bcl-2的陽性表達率分別為90％（54／60）和80％（48／60），前者陽性表達者對5-FU及ADM顯示了較強的體外耐藥性，而后者陽性表達者對5-FU、ADM及MMC顯示了較強的體外耐藥性。hTERT mRNA的表達與Bc1-2蛋白的表達的差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。hTERT mRNA陽性表達與胃癌的分

5、化程度的差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但與胃癌的TNM分期，胃癌的組織病理學類型及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）：hTERTmRNA染色強度與胃癌的組織學類型，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及TNM分期無統(tǒng)計學意義，但與胃癌的分化程度有關(guān)，低分化與高中分化胃癌的差異具有統(tǒng)計學意義。Bc1-2蛋白陽性表達與胃癌的分化程度及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有統(tǒng)計學意義（P均<0.05），但與胃癌的TNM分期及胃癌的組織病理學類型無統(tǒng)計學意義（P>0.