一個(gè)人類α甘露糖苷酶全長(zhǎng)cDNA的克隆、序列分析與編碼蛋白質(zhì)性質(zhì)初探.pdf

1、機(jī)體的蛋白質(zhì)大多以糖復(fù)合物的形式存在，而糖蛋白中的聚糖不但與蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能密切相關(guān)，而且本身也有著重要的生物學(xué)意義，因此成為繼蛋白質(zhì)和核酸之后以一生命科學(xué)的重要研究領(lǐng)域。盡管因?yàn)榫厶墙Y(jié)構(gòu)十分復(fù)雜，使其結(jié)構(gòu)和功能的研究困難重重，但近年來(lái)，隨著分子生物學(xué)和技術(shù)的滲入，極大地促進(jìn)了糖蛋白聚糖結(jié)構(gòu)和功能的研究。α-甘露糖苷酶作為一種重要的糖加工酶，參與N-聚糖的加工成熟。為了研究其在聚糖生物合成中的作用，學(xué)者們已先后從母和多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞中

2、克隆出了十多個(gè)不同的α-甘露糖苷酶的基因。自一個(gè)人扁桃體細(xì)胞λgt11cDNA文庫(kù)中篩選到了一個(gè)長(zhǎng)1358bp的cDNA克隆，內(nèi)含一個(gè)編碼425個(gè)氨基酸的開放閱讀框架。從此框架核苷酸序列推斷的氨基酸序列與一個(gè)大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)α-甘露糖苷酶氨基酸序列的后二分之一高度同源。為了確定其是否為全長(zhǎng)cDNA，研究人員進(jìn)行了人多種組織中6A8mRNANorthernblot檢測(cè)。結(jié)果表明6Ai有兩個(gè)轉(zhuǎn)錄本形式，一為±4.3kb，另一為±3.5kb。這表明