卡托普利延遲起釋型緩釋片的研制、質(zhì)量控制及其在Beagle犬內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、人體的血壓在24小時(shí)呈現(xiàn)節(jié)律性變化：清晨醒后數(shù)小時(shí)內(nèi)血壓迅速升至峰值，半夜至凌晨降至谷值。多項(xiàng)臨床研究顯示，心肌梗死、心肌缺血、猝死、卒中等心腦血管事件均好發(fā)于清晨。治療實(shí)踐表明高血壓病人最佳給藥時(shí)間為凌晨2～3時(shí)左右。 卡托普利(captopril)，為含有巰基的血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)，臨床用于各型高血壓、心功能不全的治療。其制劑除普通片劑、膠囊、注射液外，還有一日兩次的卡托普利緩釋膠囊和一日一次的緩釋片劑上市，但

2、沒有針對(duì)高血壓時(shí)間治療的相關(guān)制劑。本課題以干壓包衣技術(shù)研制了臨睡前(晚上10：00)服用，次日凌晨3：00開始并持續(xù)釋放有效劑量藥物的卡托普利延遲起釋型緩釋片(以下簡(jiǎn)稱卡托普利延緩片)，建立了質(zhì)量控制方法，并以普通卡托普利緩釋片為對(duì)照制劑，在beagle犬上按隨機(jī)交叉設(shè)計(jì)進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)試驗(yàn)，考察所研制制劑的相對(duì)生物利用度及生物等效性情況。 1.卡托普利延緩片的研制目的：制備適用于臨睡前服用，間隔4～6h后于次日凌晨開始釋放藥物并持續(xù)

3、釋放較長(zhǎng)一段時(shí)間的卡托普利延緩片。方法：用干壓包衣技術(shù)制備卡托普利延緩片，中心組合設(shè)計(jì)優(yōu)化處方，人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)預(yù)測(cè)釋藥時(shí)滯，在SAS上進(jìn)行多元線性回歸，并對(duì)優(yōu)化結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證，從而確定衣層處方。然后以卡托普利緩釋片為對(duì)照制劑，以相似因子f2為篩選指標(biāo)，確定片芯組成，從而確定最終處方。結(jié)果：所優(yōu)化的卡托普利延緩片體外釋藥時(shí)滯為5h，開始釋放后與對(duì)照制劑有良好的相似性(f2=64.06)，體外釋放符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)規(guī)律。結(jié)論：以干壓包衣技術(shù)制得包芯

4、片，由衣層控制延遲釋放的釋藥時(shí)滯，由衣層和片芯共同控制藥物緩慢釋放。 2.卡托普利延緩片的質(zhì)量控制目的：對(duì)卡托普利延緩片質(zhì)量進(jìn)行控制。方法：采用高效液相色譜法進(jìn)行質(zhì)量控制，使用DiamonsilTMC18(150×4.6mm，5μm)，應(yīng)用紫外吸收檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)220nm，柱溫采用40℃，進(jìn)樣量為20μL。其中含量測(cè)定和釋放度檢查以甲醇：水：磷酸=35：65：0.03為流動(dòng)相，流速1.0mL/min；有關(guān)物質(zhì)卡托普利二硫化物檢

5、查以甲醇：水：磷酸=45：55：0.025為流動(dòng)相，流速1.5mL/min。釋放度檢查以0.1mol/L的鹽酸溶液(人工胃液)750ml為釋放介質(zhì)，恒溫(37±0.5)℃，采用轉(zhuǎn)籃法，轉(zhuǎn)速100r/min。結(jié)果：所采用方法專屬性均良好。含量測(cè)定方法平均回收率為101.1﹪，日內(nèi)RSD1.0﹪，日間RSD為1.1﹪，卡托普利濃度在26.25～48.75μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r2=0.9994)，三批樣品(030815-1、0309

6、02、030910)含量測(cè)定結(jié)果分別為101.3﹪、99.96﹪和99.26﹪；釋放度測(cè)定方法平均回收率為99.91﹪，日內(nèi)RSD0.49﹪，日間RSD為0.65﹪，卡托普利濃度在2.5～50μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r2=0.9995)，三批樣品(030815-1、030902、030910)5h累積釋放約10﹪，開始釋放后與普通卡托普利緩釋片一致；有關(guān)物質(zhì)檢查方法平均回收率為100.9﹪，日內(nèi)RSD0.83﹪，日間RSD為1.6

7、﹪，卡托普利二硫化物濃度在2.25～13.5μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r2=0.9998)，檢測(cè)限為30ng/mL(S/N≥3)，定量限為100ng/mL(S/N≥10)(RSD=2.2﹪，n=5)，三批樣品(030815-1、030902、030910)中卡托普利二硫化物檢查結(jié)果含量分別為2.56﹪、2.53﹪和2.53﹪。結(jié)論：建立的質(zhì)量控制方法專屬性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，可有效地控制本品的質(zhì)量。 3.固相萃取——柱前

8、衍生HPLC法測(cè)定Beagle犬血漿中卡托普利的方法學(xué)研究目的：建立Beagle犬體內(nèi)卡托普利血藥濃度分析的方法。方法：以對(duì)溴苯甲酰甲基溴為衍生化試劑，血漿樣品經(jīng)衍生化反應(yīng)后，用WatersOASISTMHLB固相萃取小柱從生物樣本中提取純化衍生化產(chǎn)物，先用5﹪甲醇水溶液沖洗，再用乙醚沖洗，抽干，最后用洗脫液1ml洗脫，收集洗脫液，抽干，殘?jiān)昧鲃?dòng)相200μl溶解，取100μl注入HPLC儀；以DiamonsilTMC18為固定相，乙腈

9、：0.25﹪醋酸溶液(40：60)為流動(dòng)相，流速1mL/min，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)λ258nm，外標(biāo)法測(cè)定衍生物含量而確定卡托普利濃度。結(jié)果：血漿樣品經(jīng)預(yù)處理后在分離色譜條件下卡托普利衍生化產(chǎn)物tR在16min附近，峰形良好，對(duì)稱因子1.01，與空白血樣比較，血漿中內(nèi)源性雜質(zhì)不干擾卡托普利的測(cè)定，卡托普利衍生化產(chǎn)物與內(nèi)源性雜質(zhì)峰分離度大于2.0。測(cè)得卡托普利線性范圍為10～500ng/mL，r=0.9999，方法檢測(cè)限為5ng/mL(S/N≥

10、3)，定量限為10ng/mL(S/N≥10)(RSD=7.3﹪，n=5)，該靈敏度可以滿足Cmax的1/25藥物濃度測(cè)定。方法回收率為95.04﹪～99.59﹪(n=15)，提取回收率為85.3﹪～86.9﹪(n=15)，日內(nèi)精密度RSD為1.6﹪～3.1﹪(n=15)，日間精密度為0.70﹪～2.8﹪(n=15)。結(jié)論：建立了Beagle犬體內(nèi)卡托普利血藥濃度分析的方法，操作簡(jiǎn)單、快速，靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確，方法學(xué)研究結(jié)果和犬體內(nèi)的預(yù)試

11、驗(yàn)結(jié)果表明本法可滿足犬體內(nèi)卡托普利藥代動(dòng)力學(xué)研究要求。 4.卡托普利延緩片在Beagle犬的藥代動(dòng)力學(xué)和生物等效性研究目的：考察卡托普利延緩片在Beagle犬內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)情況，評(píng)價(jià)生物等效性。方法：取10條Beagle犬隨機(jī)交叉、單劑口服試驗(yàn)制劑(本制劑)與參比制劑(卡托普利緩釋片)，用建立的HPLC法測(cè)定給藥后不同時(shí)間點(diǎn)血漿中卡托普利藥物濃度，計(jì)算兩制劑的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)及相對(duì)生物利用度，并進(jìn)行生物等效性評(píng)價(jià)。結(jié)果：卡托普利緩

12、釋片和延遲起釋型緩釋片在Beagle犬的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為：AUC0-∞分別為888.2±368.4和877.0±392.4ng·h·mL-1，AUC0-t分別為885.9±353.4和874.9±382.7ng·h·mL-1，tmax分別為2.5±1.72和3.5±1.08h，Cmax分別為232.5±90.19和309.4±196.3ng·mL-1，t1/2分別為2.68±0.67和2.26±0.56h。以卡托普利緩釋片為參比，卡

13、托普利延緩片相對(duì)生物利用度F0-t為101.5﹪±32.2﹪，F(xiàn)0-∞為101.5﹪±33.35﹪。結(jié)論：受試制劑與參比制劑的AUC0-tn比值的90﹪置信區(qū)間為82.0﹪～116.3﹪，符合藥典規(guī)定范圍(藥典規(guī)定lnr1=80﹪，lnr2=125.0﹪)；Cmax比值的90﹪置信區(qū)間為90.65﹪～162.1﹪，超過了藥典規(guī)定的上限值(藥典規(guī)定lnr1=70﹪，lnr2=143.0﹪)。綜觀AUC和Cmax統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果，僅Cmax上限