缺血預處理對大鼠腎臟冷缺血再灌注損傷第二窗保護作用的實驗研究.pdf

1、目的：觀察缺血預處理(ischemicpreconditioning，IPC)對大鼠腎臟冷缺血/再灌注(coldischemia/reperfusion，I/R)損傷第二窗保護(secondwindowofprotection，SWOP)的作用，探討白介素-1β(interlin-1β，IL-1β)在IPC的SWOP中的作用及機制。 方法：封閉群SD大鼠48只，隨機分為4組(n=12)：空白對照組(A組)，假手術組(B組)，對照

2、組(C組)，缺血預處理組D組)。動物手術：應用10％水合氯醛0.3ml/100g腹腔注射麻醉。B組，游離左腎蒂，45min后關閉腹腔切口，24h后，切除右腎；C組，游離左腎蒂，45min后關閉腹腔切口，24h后，切除右腎，通過右腎動脈殘端插管對左腎原位灌注，通過右腎靜脈殘端直接將灌注液引流出體外，完成冷灌注后，無損傷血管夾阻斷左腎蒂，向左傾斜手術臺，將已充分游離的左腎牽至腹腔外，在裝有冰水混合物的保存袋中進行冷保存，45min后，去除保

3、存袋，開放血管夾，再灌注左腎，左腎復位，縫合切口；D組，游離左腎蒂，對大鼠左腎動脈進行四個循環(huán)的5min夾閉/5min放開造成IPC，關閉腹腔切口，24h后，后重復C組操作。4組大鼠均在術后24h再次手術下腔靜脈采血、切除左腎用來檢測。檢測IPC后I/R的大鼠血清肌酐、尿素氮改變觀察腎功能變化情況，檢測腎組織勻漿中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量；腎組織HE染色后，Paller法評分觀察腎組織損傷情況，免疫組化檢測IP

4、C后腎組織IL-1β活性的變化，TUNEL法檢測細胞凋亡。 結果：1血漿BUN、Cr測定：A組與B組相比差異均無顯著性(P＞0.05)，C組、D組、均高于B組(P＜0.01)，而且C組高于D組，差異具有顯著性(P＜0.01)；2腎臟組織勻漿SOD活力、MDA測定：A組與B組相比差異均無顯著性(P＞0.05)，A組、B組腎組織勻漿SOD活力明顯高于C、D組(P＜0.01)，而且D組高于C組(P＜0.01)；A組、B組‘腎組織勻漿M

5、DA含量測定值低于C、D、組(P＜0.01)，而且D組低于C組(P＜0.01)；3形態(tài)學檢查(HE染色)：A組、B組腎臟組織形態(tài)結構正常，C組腎小球內(nèi)紅細胞增多，腎小管腫脹，部分刷狀緣脫落，管腔內(nèi)可見脫落的細胞。D組較C組病變明顯減輕，僅見腎小球內(nèi)紅細胞增多。4免疫組化：A組、B組IL-1β微量表達，缺血再灌注后的C、D組表達均明顯增多(P＜0.01)，而且D組低于C組(P＜0.01)。5原位細胞凋亡：A、B組偶見腎小管上皮細胞凋亡，C

6、、D組明顯增多，凋亡細胞指數(shù)均明顯大于A、B組(P＜0.01)，同時，D組小于C組(P＜0.01) 結論：1本實驗建立的模型要求條件簡單、易行，便于用作研究腎移植冷缺血再灌注損傷相關的課題；2腎小管上皮細胞凋亡可能是冷缺血再灌注損傷的一個重要因素；3IPC引起腎組織白介素-1β表達明顯減低，而且減少大鼠腎臟冷缺血再灌注損傷后的腎小管細胞的凋亡，對大鼠腎臟冷缺血再灌注損傷有明顯的保護作用。推測IPC對IRI的保護可能與IL-1β表