髓過氧化物酶在內(nèi)皮細胞增殖凋亡中的作用.pdf

1、目的：內(nèi)皮細胞損傷是動脈粥樣硬化形成的始動環(huán)節(jié)，國內(nèi)外研究均證實心絞痛患者冠脈局部內(nèi)皮受損及功能紊亂與病情嚴重程度相一致，內(nèi)皮損傷的加重是病情惡化以及急性冠脈事件發(fā)生的病理生理基礎(chǔ)，內(nèi)皮損傷、內(nèi)皮功能不全對于蝕損斑塊內(nèi)皮糜爛血栓形成具有重要意義；髓過氧化物酶(MPO)水平不僅是內(nèi)皮功能不全的獨立預(yù)測因子，而且可以反映動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)的氧化應(yīng)激程度。氧化應(yīng)激可以介導(dǎo)細胞凋亡。研究發(fā)現(xiàn)蝕損斑塊內(nèi)皮糜爛處MPO含量明顯升高，內(nèi)皮細胞凋亡增加

2、，提示MPO與內(nèi)皮細胞凋亡之間可能存在內(nèi)在的聯(lián)系，本研究試圖探討MPO與內(nèi)皮細胞增殖與凋亡之間的關(guān)系。 方法：首先采用MTT比色法檢測在0.01～0.2 u/ml濃度范圍內(nèi)的MPO對體外培養(yǎng)的ECV304內(nèi)皮細胞增殖的影響，確定MPO抑制ECV304內(nèi)皮細胞生長和增殖的有效濃度。其次通過A0/EB染色結(jié)合熒光顯微鏡技術(shù)觀察該有效濃度的MPO對ECV304內(nèi)皮細胞凋亡的形態(tài)學(xué)改變，同時進一步采用流式細胞儀檢測該濃度誘導(dǎo)EcV304

3、內(nèi)皮細胞凋亡的凋亡率。 結(jié)果：在0.01～0.2 u/ml濃度范圍內(nèi)，僅有濃度為0.1u/ml的MPO顯著抑制體外培養(yǎng)的ECV304內(nèi)皮細胞的生長和增殖，顯示MPO抑制ECV304內(nèi)皮細胞的生長和增殖具有濃度選擇性。AO/EB染色結(jié)合熒光顯微鏡技術(shù)和流式細胞儀技術(shù)均發(fā)現(xiàn)0.1u/ml濃度的MPO促進ECV 304內(nèi)皮細胞凋亡，且呈時間依賴性。 結(jié)論：0.1u/ml濃度的MPO抑制體外培養(yǎng)的ECV304內(nèi)皮細胞的生長和增殖