TGF-β3和MMP-11在大鼠模型子宮肌瘤中的表達及意義.pdf

1、目的:
　　 建立子宮肌瘤大鼠模型,為藥物篩選和發(fā)病機制研究提供動物模型;通過檢測轉化生長因子β3(Transforming growth factor beta3,TGF-β3)和基質金屬蛋白酶11(Matrixmetalloproteinases11,MMP-11)在模型子宮肌瘤中的表達,來探討TGF-β3和MMP-11與子宮肌瘤發(fā)生的相關性。
　　 方法:
　　 1.建立動物模型采取隨機數字表法將20只清潔

2、級未孕雌性SD大鼠(體重180±20g)隨機分成對照組和模型組,每組10只。對照組肌肉注射生理鹽水0.1 ml/只,隔日1次,連續(xù)9周。模型組采用雌孕激素負荷法,即先肌肉注射苯甲酸雌二醇0.1 ml/只,隔日1次,連續(xù)4周,再加注黃體酮0.1 ml/只,隔日1次,連續(xù)5周。每周定期稱量體重并記錄。
　　 2.9周后,所有大鼠禁食不禁水24小時,用2％戊巴比妥鈉(40mg/kg)腹腔注射麻醉。解剖分離大鼠子宮,使之離體,肉眼觀察大

3、鼠子宮大體形態(tài)后拍照,稱重,計算子宮系數(子宮重量/體重)。
　　 3.取一部分對照組子宮組織和模型組子宮組織置于-80℃存放用于提取RNA,其余部分置于4%多聚甲醛液中固定,石蠟包埋,切片,HE染色后鏡下觀察大鼠子宮平滑肌病理改變。
　　 4.運用RT-PCR和免疫組織化學方法檢測TGF-β3和MMP-11在對照組和模型組子宮組織中mRNA水平和蛋白水平的表達差異。
　　 結果:
　　 1.模型組子宮重

4、量(1.980±0.420)、子宮系數(0.826±0.150)均比對照組子宮重量(0.696±0.150)、子宮系數(0.312±0.060)顯著性增大,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 2.模型組大鼠子宮體積較對照組大鼠子宮明顯增大、變形,肉眼可見腫脹、結節(jié)。HE染色結果也顯示,模型組大鼠子宮肌層明顯增厚,平滑肌排列紊亂,呈瘤樣改變。
　　 3.免疫組化結果顯示模型組TGF-β3的表達量((13.659±1

5、.341)×104)和MMP-11的表達量((14.621±0.647)×104)明顯大于對照組TGF-β3的表達量((3.841±0.821)×104)和MMP-11的表達量((3.781±0.619)×104),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 4.RT-PCR結果顯示TGF-β3和MMP-11在模型組大鼠子宮組織的mRNA水平的表達量明顯高于對照組大鼠子宮組織,與免疫組化染色結果一致。
　　 結論: