斑馬魚模型檢測(cè)環(huán)境內(nèi)分泌干擾作用的終點(diǎn)效應(yīng).pdf

1、棋旦大學(xué)碩士學(xué)位論文斑馬魚模型檢測(cè)環(huán)境內(nèi)分泌干擾作用的終點(diǎn)效應(yīng)EndpointEffectsinZebrafishModelforDetectingEnvironmentalDisruption院系：公共衛(wèi)生學(xué)院專業(yè)：衛(wèi)生毒理學(xué)姓名：李潔斐導(dǎo)師：金泰虞教授李衛(wèi)華副教授丁訓(xùn)誠(chéng)教授完成日期：2006年5月8日●●●復(fù)日大學(xué)頌十學(xué)位論文斑馬魚模型椅測(cè)環(huán)境內(nèi)分泌十?dāng)_作用的終點(diǎn)效應(yīng)斑馬魚模型檢測(cè)環(huán)境內(nèi)分泌干擾作用的終點(diǎn)效應(yīng)中文摘要環(huán)境內(nèi)分泌干擾物

2、(EDCs)是指對(duì)天然激素的生成、釋放、輸送、代謝、結(jié)合、效應(yīng)或消除過程具有干擾作用的外來物質(zhì)，其中環(huán)境雌激素(EEs)是最為重要的一類。EEs廣泛存在于自然界中，其品種多、應(yīng)用廣，在環(huán)境中穩(wěn)定不易被破壞，在生態(tài)環(huán)境中可通過食物鏈被富集，它們對(duì)人類健康的危害已不容忽視。環(huán)境雌激素的檢測(cè)手段最初局限于化學(xué)檢測(cè)，但方法復(fù)雜，樣品的前處理技術(shù)要求高，樣品檢測(cè)價(jià)格昂貴，限制了化學(xué)方法直接運(yùn)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)和保護(hù)中。本研究利用生物技術(shù)補(bǔ)充或替代化學(xué)技

3、術(shù)的理念，應(yīng)用斑馬魚模型檢測(cè)環(huán)境雌激素。研究中我們構(gòu)建了一套國(guó)產(chǎn)化的斑馬魚養(yǎng)殖平臺(tái)，進(jìn)行了幼魚及成年雄魚部分生命周期實(shí)驗(yàn)以檢測(cè)17Q炔雌醇、雙酚A及氯化鎘的雌激素活性以驗(yàn)證此動(dòng)物模型和檢測(cè)方法的有效性，并通過對(duì)一系列終點(diǎn)指標(biāo)的研究和探討，篩選出檢測(cè)EEs較敏感的指標(biāo)，為國(guó)內(nèi)檢澳IJEEs提供一個(gè)新的動(dòng)物模型和檢測(cè)方法。研究結(jié)果顯示斑馬魚是檢測(cè)環(huán)境雌激素較理想的模型。VTG是一個(gè)相對(duì)敏感、特異、穩(wěn)定的指標(biāo)。但對(duì)于檢測(cè)鎘等重金屬類的環(huán)境內(nèi)分

4、泌干擾物時(shí)，VTG可能并不是一個(gè)最敏感的指標(biāo)，建議結(jié)合血中類固醇激素的濃度，孵化率、產(chǎn)卵率等終點(diǎn)指標(biāo)對(duì)化學(xué)物的雌激素樣活性進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。ERQmRNA和VTGmRNA在表達(dá)上基本是一致的，但由于化學(xué)物作用機(jī)制的不同，導(dǎo)致在檢測(cè)不同的環(huán)境雌激素時(shí)其敏感性存在一定差異，建議ERQ基因可作為檢測(cè)EEs的輔助指標(biāo)。HSPTOmRNA雖然不是雌激素特異誘導(dǎo)的基因，但鑒于其高度的敏感性，建議可作為接觸EEs的預(yù)警指標(biāo)。性別比例、性腺的組織學(xué)檢查是檢

5、測(cè)EEs客觀的終點(diǎn)指標(biāo)，當(dāng)環(huán)境化學(xué)物使斑馬魚的性別發(fā)生逆轉(zhuǎn)，雌魚比例明顯升高，組織學(xué)檢查出現(xiàn)雌雄兼體或性腺發(fā)育明顯受抑制時(shí)，可明確地認(rèn)為該化學(xué)物具有雌激素樣活性。但由于這兩個(gè)指標(biāo)沒有VTG蛋白、VTGmRNA及HSP70mRNA等分子生物學(xué)指標(biāo)敏感，故推薦這兩項(xiàng)指標(biāo)在篩選和檢測(cè)EEs時(shí)可作為進(jìn)一步確認(rèn)的指標(biāo)。同時(shí)本研究結(jié)果還表明了在檢測(cè)EEs時(shí)幼魚暴露實(shí)驗(yàn)比成年雄魚實(shí)驗(yàn)更為敏感。關(guān)鍵詞：環(huán)境雌激素，斑馬魚，生命周期實(shí)驗(yàn)，卵黃蛋白原(VT