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文檔簡介
1、本實驗目的是對鏈霉菌(Streptomyces)NOV-0827菌株的發(fā)酵產(chǎn)物進行分離純化,希望從中獲得結構新穎或生物活性多樣的化合物。
Hsp90作為抗癌藥物的分子靶點備受關注。特別是毒性較小的Hsp90 C-端抑制劑是目前藥物篩選的重點。本實驗在一株鏈霉菌NOV-0827產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)了一類具有抗腫瘤活性的化合物, TLC結果提示活性組分含有香豆素類化合物,結合HPLC、HP LC-MSn信息,初步鑒定含有nov
2、obiocin(新生霉素)。對菌株NOV-0827的發(fā)酵工藝條件進行了優(yōu)化,初步設計出了該菌株的最佳發(fā)酵條件,并對其進行大量發(fā)酵。采用大孔吸附樹脂柱層析、硅膠柱層析、反相C18柱色譜、Sephadex LH-20凝膠柱層析、半制備HPLC等分離手段對菌株NOV-0827的次級代謝產(chǎn)物進行分離純化,共分離到3個化合物,NOV-0827-A、NOV-0827-B和NOV-0827-C。對獲得的化合物進行紫外、紅外、質(zhì)譜、核磁等方法分析,分別
3、與文獻中報道的香豆素類抗生素新生霉素(no vob io c in),大環(huán)內(nèi)酰胺類抗生素GT-32A和GT-32B同質(zhì)。經(jīng)過MTT法來檢測化合物的抗腫瘤活性,結果顯示化合物NOV-0827-B和NOV-0827-C均對人結腸癌細胞SW620具有較強的增殖抑制活性,其IC50值分別為1.107μmol/mL和5.358μmol/mL。
本研究是首次從同一株陸生鏈霉菌NOV-0827產(chǎn)生的次級代謝產(chǎn)物中同時分離到新生霉素(novo
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