乙酰肝素酶基因，CD44v6,MMP-7,nm23和Syndecan-1蛋白的表達(dá)及其與胃癌侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系.pdf

1、第1章乙酰肝素酶基因表達(dá)與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究.目的:探討最近被成功克隆的乙酰肝素酶基因在胃癌中的表達(dá)及其與臨床病理因素之間的相互關(guān)系.方法:選用43例胃癌組織、10例癌旁正常胃組織,術(shù)后立即用RNA保存液RNAlater保存,用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測標(biāo)本中乙酰肝素酶mRNA表達(dá),并結(jié)合患者的臨床病理指標(biāo)進(jìn)行分析.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用x<'2>檢驗(yàn)或四格表確切概率法、t檢驗(yàn),利用SPSS10.0軟件完成.結(jié)論:(1)乙酰肝

2、素酶mRNA陽性表達(dá)患者有較高的侵襲轉(zhuǎn)移性.(2)乙酰肝素酶可能是胃癌侵襲轉(zhuǎn)移中的一個(gè)重要酶,其表達(dá)與胃癌有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的個(gè)數(shù)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移度都顯著有關(guān),可能參與胃癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移.(3)乙酰肝素酶可能是胃癌預(yù)后的一個(gè)有用的分子標(biāo)志物,有待生存分析作進(jìn)一步的評價(jià).第2章胃癌組織中乙酰肝素酶mRNA表達(dá)與CD44v6、MMP-7,nm23和Syndecan-1蛋白表達(dá)相關(guān)關(guān)系研究.目的:(1)探討胃癌中CD44v6、MMP-7、n

3、m23和Syndecan-1蛋白表達(dá)及其與臨床病理因素之間的相互關(guān)系,尤其是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系.(2)探討胃癌中乙酰肝素酶mRNA表達(dá)與CD44v6、MMP-7、nm23和Syndecan-1蛋白表達(dá)的相關(guān)關(guān)系.方法:選用43例胃癌組織及遠(yuǎn)離胃癌組織的正常胃粘膜組織在腫瘤切除后用10％中性福爾馬林固定,常規(guī)HE染色,用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連接法(SP法)檢測胃癌組織和正常胃粘膜的CD44v6、MMP-7、nm23和Synde

4、can-1蛋白表達(dá)情況.細(xì)胞有棕黃色為陽性細(xì)胞,其中CD44v6染色定位于細(xì)胞膜,而MMP-7和nm23染色定位于細(xì)胞漿.按陽性細(xì)胞所占比例分為(-):陽性細(xì)胞數(shù)小于10%;(+):陽性細(xì)胞數(shù)10%~50%;(++):陽性細(xì)胞數(shù)大于50%.Syndecan-1以細(xì)胞漿/細(xì)胞膜染有棕黃色為陽性細(xì)胞,按陽性細(xì)胞所占比例分為(-):陽性細(xì)胞數(shù)小于10%;(+):陽性細(xì)胞數(shù)10%~30%;(++):陽性細(xì)胞數(shù)30%~50%;(+++)陽性細(xì)胞數(shù)

5、大于50%;為了便于統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,我們將CD44v6、MMP-7和nm23歸為陰性組和陽性組,而將Syndecan-1(-)和(+)歸為低表達(dá)組,(++)和(+++)歸為高表達(dá)組.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用x<'2>檢驗(yàn)或四格表確切概率法、t檢驗(yàn);相關(guān)分析采用Kendall等級相關(guān)分析,利用SPSS10.0軟件完成.結(jié)論:(1)首次證實(shí)胃癌中乙酰肝素酶mRNA表達(dá)與Syndecan-1蛋白表達(dá)程度之間具有顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系,胃癌中Syndecan-1表

6、達(dá)減少或缺失,可能與乙酰肝素酶活性的增高降解Syndecan-1分子胞外HS鏈有關(guān),Syndecan-1可能是乙酰肝素酶作用的靶子.Ⅳ(2)CD44v6、MMP-7、nm23和Syndecan-1可能與胃癌的發(fā)生有關(guān);CD44v6可能參與胃癌的侵襲轉(zhuǎn)移,尤其是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移;nm23可能參與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腹膜轉(zhuǎn)移的調(diào)節(jié);Syndecan-1可能參與胃癌的進(jìn)展和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移.(3)MMP-7陽性表達(dá)的胃癌向周圍組織直接浸潤的能力增強(qiáng),MMP-

7、7可能主要是參與胃癌的浸潤,而非轉(zhuǎn)移.MMP-7促進(jìn)胃癌侵襲可能是通過參與穿透基底膜(BM)和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的過程而不是促進(jìn)胃癌細(xì)胞的增殖.(4)首次研究顯示了乙酰肝素酶和MMP-7在胃癌中表達(dá)的正相關(guān)關(guān)系,提出它們在胃癌侵襲轉(zhuǎn)移中是相互協(xié)同作用的可能性.乙酰肝素酶、CD44v6和MMP-7可能通過協(xié)同作用參與胃癌的侵襲轉(zhuǎn)移.在胃癌中MMP-7可能通過CD44v6而補(bǔ)充到胃癌細(xì)胞膜上,進(jìn)而協(xié)同促進(jìn)胃癌的侵襲過程.第3章胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)

8、移預(yù)測的L0gistic回歸分析.目的:通過對影響胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移因素的分析探討較準(zhǔn)確預(yù)測胃癌有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移標(biāo)志.方法:應(yīng)用RT-PCR方法對43例胃癌組織中的乙酰肝素酶mRNA進(jìn)行檢測,應(yīng)用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連接法(SP法)檢測胃癌組織中CD44v6、MMP-7、nm23和Syndecan-1蛋白表達(dá)情況并結(jié)合可能影響胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的臨床病理指標(biāo)如年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位、Borrmann分型、組織學(xué)類型、組織分化程度