水飛薊賓對乏氧HepG2細胞增殖和凋亡的影響及其可能的機制.pdf

1、目的：水飛薊賓是一種安全性較高的傳統(tǒng)護肝藥物，近年來發(fā)現(xiàn)其有抗癌作用及對多種癌癥有化學預防作用，但是對于乏氧HepG2細胞的影響尚不明確，本實驗采用水飛薊賓作用于氯化鈷（cobalt chloride，CoCl2）誘導的乏氧HepG2細胞，探討水飛薊賓對乏氧HepG2細胞在增殖和凋亡方面的影響及其可能機制，為水飛薊賓靶向于乏氧肝癌細胞在臨床方面的應用提供實驗數(shù)據(jù)。
　　實驗方法：在體外對HepG2細胞進行傳代培養(yǎng)，在氯化鈷誘導乏氧

2、的同時加入不同濃度水飛薊賓，MTT檢測細胞的增殖抑制率，熒光染色觀察細胞的凋亡情況，細胞集落形成實驗觀察對細胞增殖能力的影響，流式細胞儀測定其細胞周期和凋亡率，用Western Blot法檢測其低氧誘導因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α， HIF-1α）和Bcl-2的表達。
　　實驗結果：水飛薊賓作用于乏氧HepG2細胞后，MTT結果顯示隨著水飛薊賓濃度增加，對乏氧HepG2細胞增殖的抑制作用增強，

3、呈時間-濃度依賴性；DAPI熒光染色顯示隨著藥物濃度升高凋亡細胞增多；平板集落形成試驗顯示隨著藥物濃度增高細胞集落形成減少；流式細胞術結果顯示隨著藥物濃度增高，G1期和G2期的乏氧HepG2細胞比例下降，乏氧HepG2細胞被阻滯在S期，且水飛薊賓可誘導乏氧HepG2細胞凋亡，呈濃度依賴性；Western Blot顯示隨著藥物濃度增高，乏氧HepG2細胞的HIF-1α、Bcl-2蛋白表達降低。
　　結論：1.水飛薊賓可抑制乏氧Hep