血必凈對(duì)門(mén)脈高壓癥大鼠經(jīng)歷無(wú)肝期后肺損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的：我國(guó)作為世界上肝臟疾病發(fā)病率最高的國(guó)家之一，各類(lèi)肝炎、肝硬化造成不可逆的肝臟損害最終發(fā)展為終末期肝病，嚴(yán)重困擾人民的健康。近半個(gè)世紀(jì)以來(lái)，依托現(xiàn)代外科手術(shù)、器官保存和圍手術(shù)期處理技術(shù)的迅猛發(fā)展，以飛躍進(jìn)步的移植免疫學(xué)和分子生物學(xué)為后盾，肝移植己成為目前治療終末期肝病唯一有效的方法。但是，由于受體全身情況差，圍手術(shù)期處理以及手術(shù)操作復(fù)雜，術(shù)后并發(fā)癥較多，其中呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥就是移植后早期導(dǎo)致患者死亡的危險(xiǎn)并發(fā)癥之一。本試驗(yàn)采用門(mén)脈高壓

2、癥大鼠模型，模擬肝移植術(shù)中受體經(jīng)歷無(wú)肝期的過(guò)程，觀察缺血—再灌注后急性肺損傷的發(fā)病機(jī)制及血必凈的保護(hù)作用，以更好的指導(dǎo)臨床肝移植術(shù)后呼吸系統(tǒng)并發(fā)癥的預(yù)防及治療，從而降低受體死亡率。 方法：選取健康雄性Wistar大鼠110只，體重250-300g，隨機(jī)選取15只作為預(yù)留正常大鼠。其余95只大鼠一期手術(shù)部分結(jié)扎、縮窄門(mén)靜脈并植入“標(biāo)志環(huán)”，3周后形成門(mén)脈高壓癥大鼠模型(PHM)，從中隨機(jī)選取5只門(mén)脈高壓癥模型大鼠，并從預(yù)留正常大鼠

3、隨機(jī)選取5只，該兩組分別行門(mén)靜脈測(cè)壓和造影，觀察門(mén)脈高壓和門(mén)體靜脈間側(cè)枝循環(huán)形成情況，測(cè)量食管下端粘膜下靜脈面積，定量分析食管下端靜脈曲張情況。剩余10只正常大鼠作為假手術(shù)組(SOG)，90只門(mén)脈高壓癥大鼠模型分為3組分別經(jīng)尾靜脈注射生理鹽水、血必凈、烏司他丁3天，行二期手術(shù)去除“標(biāo)志環(huán)”使門(mén)靜脈復(fù)張，而后同時(shí)阻斷第一肝門(mén)和肝后下腔靜脈，60min后開(kāi)放。根據(jù)復(fù)流后采集標(biāo)本的時(shí)間及所給藥物隨機(jī)分為缺血再灌注6小時(shí)組(I/R6 h)、12

4、小時(shí)組(I/R12 h)、24小時(shí)組(I/R24h)、血必凈6小時(shí)組(XBJ6h)、12小時(shí)組(XBJ12h)、24小時(shí)組(XBJ24h)、烏司他丁6小時(shí)組(UTI 6 h)、12小時(shí)組(UTI 12 h)、24小時(shí)組(UTI 24h)共9組，取動(dòng)脈血檢測(cè)PaO<,2>；取靜脈血檢測(cè)AST、ALT；取肝臟、肺、食管下端組織行病理形態(tài)學(xué)檢查(光鏡及電鏡)；取新鮮肺組織測(cè)定濕/干重比及髓過(guò)氧化物酶活性(MPO)。結(jié)果采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)

5、軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果：一期手術(shù)后3周可成功制成門(mén)脈高壓癥大鼠模型，開(kāi)腹后見(jiàn)：腹腔內(nèi)有淡黃色腹水，門(mén)靜脈直徑較正常大鼠明顯增寬，內(nèi)臟靜脈曲張。門(mén)脈高壓大鼠門(mén)靜脈壓力為15.6±3.1mmHg，較正常大鼠門(mén)靜脈壓力(7.7±1.7mmHg)明顯升高(p<0.05)。門(mén)靜脈造影顯示：門(mén)脈高壓大鼠肝臟顯影緩慢，門(mén)靜脈主干可見(jiàn)狹窄及伴行的“標(biāo)志環(huán)”，門(mén)靜脈系統(tǒng)血管迂曲擴(kuò)張，正常大鼠門(mén)靜脈系統(tǒng)血管走行自然，無(wú)血管迂曲及擴(kuò)張。食管下端組

6、織橫截面病理切片圖像分析顯示門(mén)脈高壓大鼠單位靜脈面積33.582±6.425μm<'2>，較正常大鼠單位靜脈面積5.620±1.301μm<'2>明顯升高(p<0.05)。二期手術(shù)取出“標(biāo)志環(huán)”后，門(mén)靜脈完全復(fù)張，食管下端及胃底靜脈曲張減輕。門(mén)靜脈高壓癥模型大鼠均可耐受二期手術(shù)中同時(shí)阻斷第一肝門(mén)和肝后下腔靜脈60min。二期手術(shù)后不同時(shí)間取標(biāo)本顯示：I/R 組 AST、ALT、肺組織MPO活性及肺濕/干重比均高于XBJ組、UTI組；I/

7、R 組PaO<,2>低于XBJ組、UTI組；SOG組PaO<,2>高于I/R．組、XBJ 組、UTI組；SOG組肺濕/干重比、AST、ALT、MPO活性低于其余三組。光鏡下I/R 組肺泡腔滲出，肺泡間隔增寬，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)充血水腫，部分肺泡萎縮塌陷。XBJ 組、UTI組光鏡下肺組織病變程度較輕，XBJ組、UTI組之間各指標(biāo)無(wú)明顯差異。 結(jié)論：應(yīng)用門(mén)靜脈縮窄的方法制備肝前性門(mén)脈高壓癥大鼠模型，方法簡(jiǎn)便，確切，可復(fù)性好，成功率