厚樸汁炙遠(yuǎn)志炮制品對(duì)小鼠胃間質(zhì)細(xì)胞的影響及部分機(jī)制研究.pdf

1、目的：基于課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，遠(yuǎn)志具有胃腸動(dòng)力抑制副作用，而厚樸取汁炮制遠(yuǎn)志能降低胃腸動(dòng)力障礙毒副作用。本研究從細(xì)胞水平闡釋厚樸汁炙遠(yuǎn)志炮制品改善胃動(dòng)力障礙的部分分子機(jī)制。
　　方法：本文采用體外培養(yǎng)胃起搏細(xì)胞——Cajal細(xì)胞（ICC），利用其自發(fā)的生理活動(dòng)受離子和神經(jīng)遞質(zhì)影響的原理，考察厚樸汁炙遠(yuǎn)志炮制品對(duì)鈣離子通路和一氧化氮的影響。①采用MTT法，考察空白組、遠(yuǎn)志組、厚樸組、炮制品高、中、低劑量組、遠(yuǎn)志配厚樸1:2組水煎液與

2、單味遠(yuǎn)志10g/kg組、單味厚樸20g/kg組、厚樸汁炙遠(yuǎn)志炮制品30、15、7.5g/kg組、遠(yuǎn)志配厚樸1:2（30g/kg）組含藥血清對(duì)胃Cajal細(xì)胞活力（GICC）的影響。②采用分光光度法、ELISA法，分別考察各含藥血清組對(duì)GICC細(xì)胞內(nèi)外游離Ca2+濃度、ATP酶、IP3活性的影響。③采用免疫印跡法，觀察空白組、單味遠(yuǎn)志10g/kg組、單味厚樸20g/kg組、炮制品30 g/kg組含藥血清對(duì)GICC細(xì)胞內(nèi)nNOS表達(dá)量的影響

3、。
　　結(jié)果：①對(duì)GICC活力的影響：?jiǎn)挝哆h(yuǎn)志水煎液有降低細(xì)胞活性的趨勢(shì)，厚樸組與炮制高劑量組水煎液組的細(xì)胞活性均顯著高于遠(yuǎn)志組（P<0.05）；遠(yuǎn)志10g/kg含藥血清則能顯著降低細(xì)胞活性（P<0.05），厚樸20g/kg組、炮制品30g/kg組、遠(yuǎn)志配厚樸1:2（30g/kg）組含藥血清均極顯著高于遠(yuǎn)志10g/kg含藥血清組（P<0.01）。②對(duì)GICC鈣離子通路的影響：?jiǎn)挝哆h(yuǎn)志10g/kg含藥血清組細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+濃度、A

4、TP酶活性、IP3濃度顯著高于空白組（P<0.05，P<0.01），炮制品30g/kg含藥血清組細(xì)胞外游離Ca2+濃度顯著高于空白組（P<0.01）；而單味厚樸20g/kg組、厚樸汁炙遠(yuǎn)志炮制品30、15 g/kg組、遠(yuǎn)志配厚樸1:2（30g/kg）組各含藥血清組的細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度、ATP酶活性、IP3濃度顯著低于遠(yuǎn)志10g/kg含藥血清組（P<0.05，P<0.01），單味厚樸20g/kg組、厚樸汁炙遠(yuǎn)志炮制品30、15 g/kg組

5、各含藥血清組的細(xì)胞外Ca2+濃度顯著高于單味遠(yuǎn)志10g/kg含藥血清組。③對(duì)一氧化氮通路的影響：免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果顯示：?jiǎn)挝哆h(yuǎn)志10g/kg含藥血清組的nNOS的表達(dá)明顯高于空白組，單味厚樸20g/kg、炮制30g/kg含藥血清組的表達(dá)明顯下降。
　　結(jié)論：①單味遠(yuǎn)志含藥血清能抑制胃動(dòng)力起搏細(xì)胞活性，使細(xì)胞鈣離子內(nèi)流導(dǎo)致鈣超載，誘發(fā)細(xì)胞凋亡，還能使胃間質(zhì)細(xì)胞nNOS表達(dá)增強(qiáng)影響胃動(dòng)力；②單味厚樸及厚樸汁炙遠(yuǎn)志炮制品含藥血清均能顯著